Regulação do receptor mTOR por rapamicina em camundongos de senescência acelerada: o papel da autofagia no processo de envelhecimento

Resumo

O envelhecimento é um processo natural e multifatorial caracterizado pela perda gradual da integridade fisiológica. Nesse contexto, a autofagia, um processo de degradação de conteúdo intracelular, regulado naturalmente pelo receptor sensor de nutrientes mammalian target of rapamycin (mTOR) ou quimicamente pelo fármaco rapamicina (RAPA), possui uma relação direta com a homeostasia celular e manutenção do fenótipo senescente. A senescência é um estado celular que contribui para o processo de envelhecimento, alterando metabolismo e funções da célula, causando danos locais e sistêmico ao longo do tempo, tanto a nível de tecidos e órgãos, quanto a nível de sistema imune e endócrino. Esse projeto busca investigar e identificar quais alterações no metabolismo da glicose são causadas pela autofagia estimulada por RAPA, e como isso impacta na expressão do fenótipo senescente em células do sistema imune e de tecidos e órgãos de atividade metabólica elevada, de camundongos Senescence-Accelerated Mouse Prone 8 (SAM-P8) e Senescence-Accelerated-Resistant 1 Mouse (SAM-R1). Para tal, serão avaliados: I) mecanismo moleculares e celulares associados a senescência, como: alterações no perfil metabólico do sangue por fotometria, marcadores genéticos por qPCR, perfil de citocinas por ELISA, presença de apoptose por histologia, em amostras do músculo, pâncreas, baço e fígado, e alterações na população de linfócitos do sangue e baço por citometria de fluxo; II) a relação entre a modulação da autofagia e o fenótipo senescência, através da avaliação da via de sinalização de proteínas envolvidas na ativação da autofagia por western blot; III) alterações na sensibilidade e metabolismo da glicose, como: alterações na metabolização da glicose in vivo por teste de tolerância à insulina (ITT) e à glicose (GTT), e in vitro por metabolômica, capacidade respiratória por seahorse, número de mitocôndrias por qPCR, potencial de membrana por microscopia confocal, e produção de ROS por citometria de fluxo. (AU)