Avaliação do impacto da autofagia na regulação do fenótipo senescente de linfócitos em modelo animal tratado com rapamicina

Resumo

A autofagia é uma via metabólica essencial para a manutenção da homeostase celular, a qual desempenha um papel constitutivo e ativo no controle da biossíntese de proteínas e organelas, além de ser um processo celular geneticamente regulado e conservado. Essa via é regulada naturalmente pelo receptor sensor de nutrientes denominado alvo mecanicista da Rapamicina (mTOR) ou quimicamente pelo fármaco rapamicina (RAPA), possuindo uma relação direta com a homeostasia celular e manutenção do fenótipo senescente. A senescência é um estado celular irreversível que contribui para o processo de envelhecimento, alterando o metabolismo e funções da célula, causando danos locais e sistêmico ao longo do tempo, tanto a nível de tecidos e órgãos, quanto a nível de sistema imune e endócrino. Afim de entender melhor como alterações no metabolismo celular causadas pela indução da autofagia, devido a inibição do mTOR por RAPA, regulam o fenótipo senescente de linfócitos e impacta em tecidos e órgãos metabolicamente ativos, esse projeto busca investigar a relação entre o metabolismo e a autofagia, na regulação do fenótipo senescente de linfócitos, em camundongos Senescence-Accelerated Mouse Prone 8 (SAM-P8) e Senescence-Accelerated-Resistant 1 Mouse (SAM-R1). Para tal serão avaliados: (1) mecanismo moleculares e celulares associados a senescência, como: alterações no perfil metabólico do sangue por fotometria, bem como alteração em marcadores genéticos por qPCR, no perfil de citocinas por ELISA, presença de apoptose na estrutura histológica por imunistoquimica, em amostras do músculo, pâncreas, baço e fígado, e alterações na população de linfócitos do sangue e baço, por citometria de fluxo; (2) a relação entre a modulação da autofagia e o fenótipo senescente, através avaliação da sinalização de proteínas envolvidas na ativação da autofagia por Western blot. (AU)