Investigação fenotípica e molecular da resistência à polimixina em bacilos gram-negativos isolados de pacientes hospitalizados no Estado de São Paulo

Resumo

Nos últimos anos, com o surgimento de organismos multidroga resistentes e extremamente droga resistentes, houve aumento da utilização dos antimicrobianos da classe das polimixinas, sendo estas em algumas situações, última opção terapêutica. Resistência às polimixinas vem sendo descrita e o mecanismo mais comumente encontrado em isolados resistentes às polimixinas são mutações em genes cromossômicos (por exemplo, pmrA, pmrB, mgrB, crrB, phoP, phoQ) responsáveis por modificações no lipídeo A da membrana externa, além da presença de genes mcr plasmideais. No Brasil, ainda há poucos estudos demonstrando essas mutações nestes genes, e além disso, dados permanecem escassos em relação ao impacto no perfil virulento que essas modificações causadas por mutações nestes genes podem ocasionar assim como a expressão gênica dos genes envolvidos na resistência à essa classe. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho é investigar a genética da resistência à polimixina e a virulência em membros da ordem Enterobacterales isolados de diferentes sítios de infecção de pacientes hospitalizados do Estado de São Paulo. Será realizada por PCR a pesquisa de genes cromossômicos e plasmidiais assim como os grupos de plasmídeos (Inc) circulantes entre os isolados do estudo. Plasmídeos detectados carreando genes de interesse serão caracterizados por hibridação. Além disso, a expressão gênica de determinados genes encontrados será realizada por RT-PCR; a caracterização do lipídeo A será avaliada por MALDI-TOF e o perfil virulento antes e depois da exposição a diferentes concentrações do antimicrobiano será avaliado utilizando o modelo Galleria mellonella. Este conhecimento torna-se fundamental para que a epidemiologia de genes mcr assim como plasmídeos envolvidos na disseminação dos mesmos, mutações responsáveis pelo fenótipo apresentado e o impacto no perfil virulento possam ser conhecidos em isolados do Brasil. Com esses resultados, esperamos contribuir com a comunidade científica no intuito de conhecer melhor a genética da resistência à polimixina nos isolados do estudo assim como possíveis mudanças no perfil virulento ocasionadas por mutações em genes cromossômicos e, possivelmente, contribuir com a melhor optimização da antibioticoterapia para infecções causadas por organismos multidroga resistentes. (AU)