Reações adversas no tratamento do câncer de pulmão de não pequenas células: contribuição de fatores clinicos, genéticos e epigenéticos

Resumo

O carcinoma de pulmão é a principal causa de morbidade e mortalidade relacionada ao câncer no mundo, com mais de 2,2 milhões de novos casos e 1,8 de óbitos estimados para 2020. O tipo mais comum de câncer de pulmão é o câncer de pulmão de não pequenas células (CPNPC). A estratégia de tratamento no CPNPC avançado evoluiu da quimioterapia empírica para uma abordagem personalizada baseada na melhor caracterização histológica e molecular dos tumores primários do CPNPC. Apesar dos grandes avanços nas terapias direcionadas e na imunoterapia, os tratamentos quimioterápicos à base de platina continuam sendo utilizados. Nesta pesquisa, focaremos em tratamentos baseados em carboplatina combinada com paclitaxel e em gefitinibe (tratamento de NSCLC com mutação em EGFR). O uso dos derivados de platina é limitado principalmente devido a reações adversas (RAMs),como RAMs hematológicas, renais e hepáticas, e tem sido relatado na literatura a importância das variações individuais na presença e gravidade destas reações. No mesmo contexto, o uso do gefitinibe, um inibidor seletivo da tirosina-quinase do EGFR, pode levar a RAMs frequentes e graves (relatadas em mais da metade dos casos), como diarreia e erupção cutânea. A literatura sugere que existem fatores clínicos, genéticos e epigenéticos que podem estar envolvidos no desenvolvimento dessas RAMs, das quais as mais frequentes são a RAM hematológica no caso de tratamentos à base de carboplatina e paclitaxel e erupção cutânea no caso de pacientes tratados com gefitinibe. Com base neste histórico, propõem-se os seguintes objetivos gerais: 1) Identificar fatores clínicos, genéticos e epigenéticos relacionados as RAMSs induzidas por carboplatina/paclitaxel ou gefitinib em NSCLC; 2) Descrever a contribuição de miRNAs desregulados no plasma de pacientes com NSCLC na RAM hematologica induzida por carboplatina/paclitaxel e na erupção cutânea induzida por gefitinibe. Metodologia: 1) O estudo é observacional e prospectivo com estratégia de amostragem consecutiva e não probabilística. Os pacientes serão agrupados em A) grupo carboplatina + paclitaxel (sem mutação EGRF): de cada paciente serão obtidas amostras de sangue antes e 20 dias após a administração de carboplatina/paclitaxel e B) grupo gefitinibe (com mutação EGRF, que iniciam ou já fazem parte do protocolo de tratamento com Gefitinibe): de cada paciente serão obtidas amostras de sangue 30 dias após a administração de gefitinibe. Os dados clínicos e demográficos serão obtidos de todos os pacientes. As RAMs serão classificadas de acordo com os Critérios Comuns de Eventos Adversos do National Cancer Institute versão 5. A avaliação dos polimorfismos genéticos (SNPs) serão realizados por RTPCR através de ensaios de genotipagem TaqMan. A avaliação da expressão de miRNAs será realizada por sequenciamento e após a validação por RTPCR. 2) A predição de alvos será realizada utilizando o TargetScan para avaliar diferencialmente os miRNAs que se mostraram promissores no estudo in vivo, também será realizado a análise de bioinformática para avaliação de vias canônicas possivelmente envolvidas com o objetivo de avaliar as implicações da alteração da expressão de miRNA e selecionar genes alvo potencialmente relacionados as RAMs. A validação in vitro da interação miRNA-mRNA será avaliada pelo ensaio de luciferase. Ensaios funcionais in vitro serão realizados para validar a contribuição dos miRNAs no processo das RAMs. A expressão de miRNAs será modulada por superexpressão utilizando miméticos e inibidores, trabalharemos com as duas linhagens celulares de linhagem mieloide e duas de linhagem epidérmica. Os ensaios funcionais a serem avaliados dependerão do alvo relacionado aos miRNAs selecionados. Além disso, será avaliada a expressão gênica (por PCR em tempo real) e proteica (por western blot) dos genes alvo relacionados aos miRNAs validados. (AU)