Pesquisa de canais iônicos em porífera e coração de Perna perna (Molusco, Bivalve)

• Processo: 94/00694-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 1994
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 1996
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Luiz Carlos Salomão
• Beneficiário: Luiz Carlos Salomão
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Moluscos Bivalvia Canais iônicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bicamadas | Canais Ionicos | Esponja | Molusco Bivalve

Resumo

A proposta deste projeto é a identificação e caracterização de canais iônicos em invertebrados através da técnica de incorporação de vesículas naturais em bicamada lipídica. Além disso, como parte de um projeto em cooperação com o Instituto de Ciências Biomédicas da USP, também empregaremos a técnica de "patch clamp" com objetivos semelhantes. Inicialmente serão pesquisados canais em esponjas frequentes em nosso litoral e no molusco bivalve Perna, objeto de pesquisas eletrofisiológicas em nosso Laboratório. Essencialmente a técnica de obtenção de vesículas naturais contendo canais será a do fracionamento celular - homogeneização, centrifugação. Bicamadas lipídicas serão obtidas "pintando-se" a fenda (0,33 mm2) de uma câmara de Teflon com soluções de fosfolipídios ou asolecitina, dissolvidos em decano, inserida num bloco de PVC, de forma a delimitar 2 compartimentos. Soluções iônicas de diferentes concentrações serão colocadas nestes 2 compartimentos e a eventual incorporação de um canal na bicamada resultará numa corrente que, convertida em tensão através do equipamento, será monitorada através de um osciloscópio. O fenômeno deverá ser diretamente registrado num polígrafo ou, preferencialmente, armazenado num videocassete para ulterior análise através do sistema p-Clamp (Axon Instruments). (AU)