Controle da infecção utilizando células NK-92 expressando Receptor Antigênico Quimérico (CAR) específico para Aspergillus spp.

• Processo: 24/19276-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Proposta de Mobilidade: SPRINT - Projetos de pesquisa - Mobilidade
• Pesquisador responsável: Thiago Aparecido da Silva
• Beneficiário: Thiago Aparecido da Silva
• Pesquisador Responsável no exterior: Pappanaicken Kumar
• Instituição Parceira no exterior: University of Texas MD Anderson Cancer Center (MD Anderson), Estados Unidos
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/18538-0 - Bioengenharia de células T e NK através de receptores CAR contra infecções fúngicas invasivas, AP.JP
• Assunto(s): Aspergillus fumigatus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus fumigatus | Células NK-92 | Dectina-1 | Dectina-2 | Receptor antigênico quimérico (CAR) | Terapia Celular e Infecções Fúngicas Invasivas

Resumo

Terapia celular acoplada com Receptor Antigênico Quimérico (CAR) é uma nova abordagem que utiliza a bioengenharia de células da imunidade para torná-las específicas para um alvo com o objetivo de induzir a morte de patógenos ou células humana alteradas (câncer). Essa tecnologia envolve a modificação de células da imunidade com receptores quiméricos, na superfície celular, com a capacidade de reconhecer alvos específicos que permitem a atuação das células modificadas diretamente sobre o patógeno ou células cancerígenas. No Auxílio Jovem Pesquisador apoiado pela FAPESP, o grupo de pesquisa de da Silva tem avaliado a capacidade do CAR em redirecionar células T e NK para reconhecerem infecções fúngicas invasivas. Esse grupo tem desenvolvido distintos construtos do CAR específico para Cryptococcus spp. a partir de anticorpo monoclonal (clones 18B7 e 2H1) como domínio de ligação ao alvo que possibilita a interação com GXM, denominado GXMR-CAR. Além disso, o grupo de da Silva tem avançado na construção de CAR específico para Candida spp. e Paracoccidioides brasiliesnsis. Essas abordagens tem demonstrado o potencial de CAR específico para fungos em redirecionar células T e NK-92 com favorecimento do controle das infecções fúngicas em estudo. Nesse contexto, o grupo do Prof Pappanaicken Kumar tem atuado como colaborador, e esse pesquisador apresenta como foco central o desenvolvimento de CAR específico para Aspergillus spp., com publicações pioneiras nessa linha investigativa. Aspergillus fumigatus é comumente encontrado no solo e a inalação dos conídios permite o estabelecimento no trata respiratório e disseminação para outros órgãos. Indivíduos imunocomprometidos apresentam alto risco de aspergilose invasiva caracterizada pela invasão da forma de hifa de A. fumigatus no tecido pulmonar. A. fumigatus spp. tem a capacidade de evadir do reconhecimento de receptores lectina tipo-C (CLR), como Dectina-1 e Dectina-2, que é capaz de mediar uma resposta imune contra a aspergilose de forma mais eficaz. CLR desencadeia uma via de sinalização intracelular que promove o recrutamento de Syk quinase para iniciar uma cascata de sinal crucial para induzir uma resposta imune celular antifúngica protetora. O papel central de CLR na construção de CAR específico para A. fumigatus e Candida spp. é o principal foco de pesquisa do laboratório do Pappanaicken Kumar que coordena um grupo líder na investigação da terapia celular com a tecnologia com CAR contra infecções fúngicas invasivas. Na presente proposta, os grupos coordenados por Kumar e da Silva buscam agregar suas expertises e atividades de pesquisa para gerar os novos construtos CAR específico para Aspergillus fumigatus (AF-CAR) contendo como moléculas coestimulatórias Dectina-1 ou Dectina-2, resultando em AF-Dectin-1-CAR e AF-Dectin-2-CAR, para modificar células NK-92. Estudos prévios demonstram uma capacidade elevada da via de sinalização de receptores lectina tipo-C para induzir um direcionamento de perforina em células NK, inclusive a linhagem celular NK-92, no sítio de contato com as células alvo. Com isso, a ativação de vias de sinalização de Dectina-1 e Dectina-2 favorecerá a polarização de altos níveis de perforina para a sinapse entre as células NK-92 e o fungo, fato que propicia a citólise direta do fungo. Os investigadores que coordenam a presente proposta apresentam conhecimento necessário para desenvolver os novos construtos do CAR, além disso, a elevada capacidade da transdução de sinal dos receptores Dectina-1 e Dectina-2 para recrutar Syk quinase viabiliza o papel de AF-Dectin-1-CAR e AF-Dectin-2-CAR em polarizar uma produção aumentada de perforina para o sítio de contato entre as células NK-92 modificadas e o A. fumigatus. Portanto, a indução do killing de A. fumigatus. de forma dependente de perforina através das células NK-92 modificadas será avaliada no controle da infecção in vitro e in vivo de aspergilose invasiva. (AU)