Desenvolvimento de técnicas de extração líquido-líquido e de precipitação para a purificação de xilanase e amiloglicosidase

• Processo: 95/03497-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 1995
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 1997
• Área do conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Beatriz Vahan Kilikian
• Beneficiário: Beatriz Vahan Kilikian
• Instituição Sede: Escola Politécnica (EP). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Extração líquido-líquido Processamento downstream Bioprodutos Endo-1,4-beta-xilanases Glucana 1,4-alfa-glucosidase Etanol

Resumo

Os produtos obtidos por processos biotecnológicos geralmente são produzidos a partir de meios complexos e obtidos de forma diluída, precisando ser concentrados e purificados de acordo com a posterior utilização. Desenvolver técnicas de "downstream" é fundamental para a viabilização técnica e econômica da produção de qualquer bioproduto. As proteínas, justificadamente, são os bioprodutos que maior atenção têm recebido, tendo em vista a importância de suas aplicações e a variedade e complexidade dessas moléculas. O presente projeto visa o desenvolvimento das técnicas de extração líquido em duas fases aquosas (Aqueous Two-Phase Systems - ATPS) na forma PEG/SAL e na forma de micela reversa, além da técnica de precipitação com etanol. Os casos de estudo serão as enzimas extracelulares xilanase e amiloglicosidase. A purificação por ATPS em PEG/SAL é uma técnica que vem apresentando avanços significativos nos últimos anos, por exemplo, através da modificação da hidrofobicidade da proteína. A extração com micela reversa é uma técnica emergente e trata-se de uma variação mais complexa do sistema ATPS, o que justifica sua inclusão nessa proposta, tanto para seu desenvolvimento, como para comparação com o sistema PEG/SAL. A precipitação em solventes orgânicos é praticada há muito tempo para biomoléculas de baixo peso molecular, sendo usada em larga escala, por exemplo, para o fracionamento de proteínas do plasma, porém, com uso industrial bem menos difundido para proteínas de maior peso molecular, como é o caso da amiloglicosidase e xilanase. Além disso, a possibilidade de purificação por meio do uso de etanol é particularmente interessante no Brasil, sendo também um solvente de fácil recuperação e reciclagem. (AU)