Determinação do papel do ativador de transcrição taça no metabolismo e desenvolvimento de Caulobacter crescentus

• Processo: 96/06616-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1997
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 1999
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marilis Do Valle Marques
• Beneficiário: Marilis Do Valle Marques
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Caulobacter Transcrição genética Expressão gênica RNA polimerase sigma 54 Análise de sequência de DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caulobacter | Expressao Genica | Sigma 54 | Transcricao

Resumo

Em Caulobacter crescentus, o fator alternativo sigma 54 controla a biogênese do flagelo, a formação do talo e também está envolvido no controle do ciclo celular. A transcrição mediada por sigma 54 depende de proteínas ativadoras distintas que se ligam aos promotores. O gene tacA, isolado recentemente pelo nosso grupo (Marques et al., 1996), codifica uma proteína que possui todas as características estruturais de um ativador de transcrição de promotores sigma 54, sendo sua expressão regulada durante o ciclo de vida da bactéria. Nosso objetivo principal é determinar quais os promotores-alvos do fator TacA, permitindo assim caracterizar quais os processos dependentes de sigma 54 em C. crescentus que são regulados por este fator. Para isto, usaremos como abordagem a varredura de uma biblioteca de expressão utilizando uma estratégia específica para determinar promotores dependentes de tacA. Também pretendemos determinar se alguma sequência específica do promotor de tacA é reconhecida pela proteína CtrA, utilizando esta proteína recombinante expressa em E. coli, em ensaios de "gel mobility shift" e "footprinting". A unidade de transcrição que se localiza a 5' do gene tacA e em sentido divergente a este será completamente sequenciada, e sua relação com o gene tacA investigada. (AU)