Mecanismo de acao e regulacao de uma fosfatase alcalina no processo de ossificacao: caracterizacao cinetica de uma atpase em membranas de placas osseas livres de fosfatase alcalina.

• Processo: 97/03396-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 1997
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 1999
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Francisco de Assis Leone
• Beneficiário: Francisco de Assis Leone
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Fosfatase alcalina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atpase | Fosfatase Alcalina | Fosfatidil Inositol | Fosfolipase C | Nitrofenil Fosfato | Placa Ossea

Resumo

A fosfatase alcalina de placa óssea é induzida durante o processo de ossificação endocondral através do implante de pó de osso desmineralizado no tecido subcutâneo de rato. Ela é uma metaloenzima constituída por duas subunidades aparentemente iguais de Mr=65 kD e apresenta características multifuncionais. Essa enzima está ligada à membrana através da âncora do fosfatidilinositol. O tratamento da membrana com fosfolipase C, dependente de fosfatidil inositol, removeu cerca de 90-95% da fosfatase alcalina e também revelou que existe ainda associada à membrana, uma enzima que hidrolisa especificamente o ATP. Além disso, a contaminação em fosfatase alcalina (5 a 10%) é completamente eliminada na presença de teofilina 5 mM. O presente projeto tem como principal objetivo a caracterização estrutural e cinética dessa ATPase que permanece na membrana após tratamento com fosfolipase C, dependente de fosfatidil inositol. (AU)