Marcação de spin sítio dirigida e ressonância magnética eletrônica: uma nova abordagem para o estudo de interações membrana-proteina e proteína-proteína

• Processo: 07/51022-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Física - Física da Matéria Condensada
• Pesquisador responsável: Antonio José da Costa Filho
• Beneficiário: Antonio José da Costa Filho
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Ressonância paramagnética eletrônica Marcadores de spin Diidroorotato desidrogenase Interação proteína-proteína
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Interacao Proteina-Membrana | Marcacao De Spin Sitio Dirigid

Resumo

No presente projeto é proposto o estudo das enzimas Diidroorotato desidrogenase (DHODH) de vários organismos e clorocatecol 1,2-dioxigenase (CCD) de Pseudomonas putida através, principalmente, de uma metodologia que se vale da técnica de Ressonância Magnética Eletrônica (RME) e da possibilidade de inserirmos sondas paramagnéticas seletivamente em estruturas protéicas (marcação de spin sítio dirigida - SDSL). A enzima DHODH participa da quarta etapa seqüencial da síntese de novo de nucleotídeos de pirimidina, essencial e enzima CCD catalisa a clivagem de hidrocarbonetos sintéticos aromáticos continuamente liberados pela indústria moderna. No presente projeto, é proposto o estudo da correlação estrutura-função dessas enzimas em situações que envolvem tanto a presença de seus ligantes naturais quanto de modelos de membrana em casos em que isto se aplique. Com isto, buscamos ainda a implementação da metodologia envolvida nos experimentos de SDSL-RME em nosso grupo de pesquisa e sua disponibilização para posteriores aplicações. (AU)