Estudo da invasão de hepatócitos de rato por Shigella flexneri: a análise da influência da hipóxia sobre a injúria celular

• Processo: 08/57623-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Dahir Ramos de Andrade Júnior
• Beneficiário: Dahir Ramos de Andrade Júnior
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Shigella flexneri Hepatócitos Hipóxia Fator de necrose tumoral alfa Fatores de transcrição Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Hepatocito | Hif-1Alpha | Hipoxia | Shigella Flexneri | Tnf-Alpha

Resumo

A inflamação causada por Shigella flexneri pode ocasionar lesões na mucosa colônica, causando morte por necrose e apoptose das células desta região. Devido à degeneração do epitélio, as bactérias podem alcançar a corrente sanguínea e se alojar preferencialmente no fígado. Neste caso as bactérias tendem a invadir os hepatócitos, que apresentam papel potencial em iniciar ou amplificar a resposta inflamatória aguda no fígado, através da produção de citocinas pró-inflamatórias. A hipóxia pode estar presente no fígado em decorrência de várias doenças, causada pela proliferação celular descontrolada (no caso de neoplasias), por congestão hepática ou por dificuldade na perfusão. O microambiente com hipóxia também pode ocorrer pelo aumento do consumo de oxigênio em processos infecciosos, devido à proliferação bacteriana e ao aumento das células inflamatórias. Neste projeto pretendemos avaliar a invasão de hepatócitos de rato cultivados em cultura primária por Shigella flexneri, verificando a influência da hipóxia sobre este processo. Para tal analisaremos, em condição de normóxia e hipóxia, a porcentagem de invasão de hepatócitos por S. flexneri, a produção de TNF-alpha, a porcentagem liberada de DHL e a quantificação da morte celular por apoptose, a fim de dimensionar a injúria celular causada pela invasão bacteriana. Também analisaremos a expressão do fator de transcrição HIF-1alpha, para avaliar se a infecção com S. flexneri induz a expressão dessa proteína. (AU)