Estudo in vivo e in vitro do efeito do laser de baixa intensidade na reparação óssea em um modelo de fratura em fêmur de ratos

• Processo: 09/10506-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Helio Plapler
• Beneficiário: Helio Plapler
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Ortopedia Remodelação óssea Fêmur Laser
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fraturas do femur | Remodelação óssea | Terapia a laser de baixa intensidade | Ortopedia

Resumo

O objetivo será determinar o efeito da terapia laser de baixa intensidade na reparação óssea em fraturas de fêmur. Serão utilizados 90 ratos da raça Wistar albinos adultos, machos, pesando aproximadamente 350g. Os animais serão distribuídos em três grupos (A, B e C) de acordo com o procedimento a ser realizado e cada grupo será subdividido em três subgrupos (1, 2 e 3) conforme o período de eutanásia. Será criado um modelo de fratura óssea total retirando um segmento ósseo de 1,6mm de comprimento do terço médio da diáfise do fêmur esquerdo destinado ao estudo "in vitro" das alterações celulares que ocorrem com este tecido. Para isto foi desenvolvido um "clamp" especialmente destinado para a retirada deste segmento ósseo regular e inteiro. Após a colocação do "clamp" no fêmur, será feita uma osteotomia com uma serra oscilatória de cada lado desta pinça para que seja retirado o segmento do osso. Os fragmentos ósseos serão estabilizados com uma placa especial de 4 furos e fixados com 3 parafusos de 1,5mm e 1 parafuso de 1,7mm, mantendo um espaço de 2mm de distância entre as superfícies da osteotomia. O segmento ósseo retirado grupo será imediatamente encaminhado ao laboratório para cultura. Tanto animais quando culturas correspondentes ao Grupo A serão expostos à radiação laser de baixa intensidade (GaAlAs) na potência de 200 mW, comprimento de onda 808 nm, dosagem de 2J/cm2 em ambiente seguro e controlado. Serão realizadas 08 aplicações em dias seqüenciais (do 1o até o 8o PO). O Grupo B terá exatamente o mesmo tratamento e se constituirá no Grupo sham, cuja exposição será efetuada com o instrumento laser desligado. O Grupo C corresponderá ao grupo controle, que não sofrerá nenhuma intervenção. A eutanásia dos animais dos sub-grupos 1, 2 e 3 ocorrerá respectivamente no 8o, 13o e 18o dia de pós-operatório, após a avaliação cinemática e a coleta de sangue para exames laboratoriais. Serão realizadas dosagens de fosfatase alcalina total, cálcio total, corticosterona, contagem de osteoblastos e osteoclastos. Ainda será realizada análise imunohistoquímica usando marcadores de crescimento ósseo (osteocalcina, osteopontina e osteonectina). Os resultados serão analisados estatisticamente pelo teste de Kruskal Wallis e teste exato de Fisher. (AU)