Análise funcional dos mecanismos reguladores da transcrição e amplificação em pufes de DNA

• Processo: 99/12787-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2000
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2005
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nadia Monesi
• Beneficiário: Nadia Monesi
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 04/08166-6 - Análise do papel dos genes iniciais E74 e E75 na regulação da expressão do gene de pufe de DNA BhC4-1 na glândula anelar de Drosophila melanogaster, BP.IC; 03/08367-9 - Mapeamento de elementos cis-reguladores da expressão do gene BhC4-1 na glândula anelar de Drosophila melanogaster, BP.IC; 02/06090-7 - Caracterização funcional do fragmento de 129 Pb (-186 a -58) da região promotora do gene de pufe de DNA BhC4-1, em linhagens transgênicas de Drosophila, BP.MS; 02/05015-1 - Mecanismo de resposta do gene BhC4-1, do pufe de DNA C4 de Bradysia hygida ao hormônio 20-hidroxiecdisona, BP.IC; 00/11009-9 - Análise funcional dos mecanismos reguladores da transcrição e amplificação em pufes de DNA, BP.JP
• Assunto(s): DNA Cromossomos Drosophila Amplificação de genes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Amplificacao Genica | Drosophila Transgenicas | Ecdisona | Pufes De Dna | Sciaridae
• Publicação FAPESP: https://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_99_109_109.pdf

Resumo

Os pufes de DNA formados nos cromossomos politênicos da glândula salivar de Sciaridae são sítios de amplificação e intensa atividade transcricional reguladas no desenvolvimento. O presente projeto trata da caracterização dos mecanismos moleculares que regulam esses processos nestas regiões do genoma. O projeto tem dois objetivos gerais. O primeiro objetivo é a caracterização fina do promotor do gene BhC4-1 de B. hygida, cuja regulação tecidual e temporal se mostrou conservada em linhagens transgênicas de Drosophila (MONESI et al., 1998). Esta parte do projeto envolve o estabelecimento de novas linhagens transgênicas de Drosophila, a realização de ensaios funcionais nestas linhagens, bem como a realização de ensaios de retardamento em gel. O segundo objetivo é o estabelecimento de um sistema que permita a identificação de regiões funcionalmente importantes para a amplificação. Duas abordagens são consideradas: a) a análise de linhagens de Drosophila transformadas com um fragmento de 17kb do pufe de DNA C3 de Rhynchosciara americana, que contém a região de início da replicação utilizada no processo de amplificação; b) ensaios transitórios em núcleos da glândula salivar de B. hygida através da injeção de construções contendo o fragmento de 17kb do pufe de DNA C3. (AU)