Identification of FBXO25-interacting proteins using an integrated proteomics approach

• Processo: 10/15089-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Marcelo Damário Gomes
• Beneficiário: Marcelo Damário Gomes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Ubiquitinas Complexo de endopeptidases do proteassoma Proteômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fands | Fbxo25 | Nuclear Actina | Proteassoma | proteômica | Ubiquitina | Proteomica

Resumo

FBXO25 é uma das 68 proteínas do tipo F-Box (FBP), que servem como adaptadores das ubiquitina ligases do tipo SCF1 (Skp1-Culina1-FBP) que estão envolvidos degradação de proteínas pelo sistema ubiquitina proteassoma (SUP). Recentemente, foi mostrado que FBXO25 acumula-se em micro ambientes nucleares denominados de FANDs (FBXO25-Associated Nuclear Domains). Através da combinação de duas estratégias de identificação de interação proteína-proteína (TAP tag e duplo híbrido em leveduras) foram identificadas 132 proteínas ligantes de FBXO25. Um dos ligantes caracterizados foi a ²-actina que mostrou-se interagir diretamente através do seu N-terminal com o C-terminal de FBXO25 e esta presente nos FANDs de células HeLa. Inibidores da polimerização da actina promoveram uma redistribuição significativa dos FANDs indicando que esses compartimentos são influenciados pelo estado de organizacional da ²-actina nuclear. Além disso, anticorpos anti-FBXO25 inibem in vitro a transcrição da RNA polimerase II. Nossos resultados abrem novas perspectivas para a compreensão deste novo sub-compartimento e suas funções nucleares. (AU)