Papel da ubiquitina em garanhões com alta e baixa congelabilidade e aplicação da coenzima Q-10 como promotora da função mitocondrial espermática

• Processo: 16/14626-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Rubens Paes de Arruda
• Beneficiário: Rubens Paes de Arruda
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Eneiva Carla Carvalho Celeghini
• Assunto(s): Andrologia Espermatozoides Cavalos Citoesqueleto Equinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: andrologia | Citoesqueleto | congelação de sêmen | equino | Espermatozóide | garanhão | Andrologia Animal

Resumo

Estudos demonstram que uma das principais limitações para o uso do sêmen congelado equino é a alta variabilidade entre garanhões com relação a capacidade espermática em sobreviver à criopreservação. A ubiquitina é uma molécula que está envolvida em uma via de degradação de proteínas danificadas, ou com erros de síntese. Este processo ocorre na passagem do espermatozoide pelo epidídimo e está relacionado com a infertilidade no macho. Por outro lado, a coenzima Q-10 (CoQ-10), é um cofator na cadeia de transporte de elétrons na mitocôndria, essencial para a produção de energia em forma de ATP e pode ser uma alternativa para melhorar a qualidade do sêmen criopreservado equino. Levando em consideração citações acima, delineou-se dois experimentos. Em ambos serão utilizados 4 garanhões com alta resistência a congelabilidade (AC) e 4 com baixa resistência a congelabilidade (BC). Cada animal será submetido a 5 colheitas de sêmen seguidas de congelações. Experimento 1: analisará a quantidade de ubiquitina em garanhões com alta e baixa congelabilidade pela técnica de sperm-ubiquitin tag immunoassay (SUTI) e correlacionará com outros parâmetros do sêmen como características de motilidade espermática (CASA), integridades de membrana plasmática, acrossomal e potencial de membrana mitocondrial (através das sondas fluorescentes iodeto de propídeo, Hoechst 33342, JC-1 e FITC-PSA), alterações no citoesqueleto (phalloidin-FITC) e morfologia espermática (DIC). Experimento 2: o sêmen será criopreservado com a adição da CoQ-10 a 50µM enquanto a amostra controle será criopreservada somente com Botucrio®. As partidas de sêmen serão analisadas quanto às mesmas características do experimento 1, excluindo-se a técnica de SUTI e adicionando-se a função mitocondrial (DAB e sonda fluorescente Mito Traker Red®). (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

RENATA LANÇONI; ENEIVA CARLA CARVALHO CELEGHINI; VALDEMAR DE GIULI JÚNIOR; CARLA PATRICIA TEODORO DE CARVALHO; GABRIELA BERTAIOLLI ZOCA; LAURA NATALY GARCIA-OLIVEROS; LEONARDO BATISSACO; LETÍCIA ZOCCOLARO OLIVEIRA; RUBENS PAES DE ARRUDA. Coenzyme Q-10 improves preservation of mitochondrial functionality and actin structure of cryopreserved stallion sperm. Animal Reproduction, v. 18, n. 1, 2021-04-12. (16/14626-7)

LANCONI, RENATA; CARVALHO CELEGHINI, ENEIVA CARLA; DE GIULI JUNIOR, VALDEMAR; TEODORO DE CARVALHO, CARLA PATRICIA; ZOCA, GABRIELA BERTAIOLLI; GARCIA-OLIVEROS, LAURA NATALY; BATISSACO, LEONARDO; OLIVEIRA, LETICIA ZOCCOLARO; DE ARRUDA, RUBENS PAES. Coenzyme Q-10 improves preservation of mitochondrial functionality and actin structure of cryopreserved stallion sperm. ANIMAL REPRODUCTION, v. 18, n. 1, p. 9-pg., 2021-01-01. (16/14626-7)