Estudo da regulação gênica do PbGP43, que codifica um antígeno majoritário de Paracoccidioides brasiliensis: mapeamento de elementos de transcrição

• Processo: 05/54791-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2005
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Rosana Puccia
• Beneficiário: Antonio Augusto Rocha
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Paracoccidioides brasiliensis Regulação da expressão gênica Transcrição genética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Elementos De Transicao | Pbgp43 | P.Brasiliensis | Regulacao

Resumo

A gp43 de Paracoccidioides brasiliensis é o principal antígeno diagnóstico e prognóstico da paracoccidioidomicose humana. É candidata a vacina e/ou agente imunoterápico e um potencial fator de virulência devido às suas propriedades de adesina. Resultados prévios mostraram que a gp43 sofre regulação transcricional, porém também parece ser regulada em nível de proteína e secreção. Os mecanismos envolvidos na regulação da expressão do antígeno são, no entanto, desconhecidos e são de interesse do laboratório. Este projeto de passagem da bolsa de mestrado para o doutorado direto visa dar continuidade ao projeto de mestrado (que teve como objetivo o mapeamento de elementos de transcrição do PbGP43) e ampliar a abordagem. Pretende-se completar o mapeamento de elementos de transcrição da região promotora consenso do Pb339 e polimórfica do Pb3. Para tal, serão realizados experimentos extras de Dnase footprinting e EMSA, já utilizados no mestrado. Pretende-se clonar região 5 intergênica desconhecida e avaliar os elementos que possam estar aí contidos. Serão pesquisados, através de RT-PCR, fatores de regulação do gene com o fungo cultivado in vitro, em paralelo com a expressão protéica. Esses resultados serão úteis no estudo da funcionalidade dos elementos de transcrição mapeados, os quais poderão ser feitos pela expressão de genes repórteres no próprio fungo ou em fungos como Histoplasma capsulatum ou Blastomyces dermatitididis, para os quais a manipulação genética está padronizada. (AU)