Analise da atividade transcricional de sequencias conservadas nas regioes intronicas do gene pax9.

• Processo: 06/05187-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2007
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Sergio Roberto Peres Line
• Beneficiário: Carolina de Almeida Araujo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Transcrição genética Hipodontia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hipodontia | Pax9 | Transcricao Genica | Biologia Buco Dental

Resumo

Agenesia dental ou hipodontia e oligodentia são alterações freqüentes da dentição humana, atingindo cerca de 5% a 10% da população européia e asiática. Apesar de não consistirem um problema de saúde pública, podem causar alterações na função mastigatória e fala, além de, em alguns casos, tornar-se um desconforto estético. Em humanos, a agenesia foi associada a mutações no gene homeobox PAX9, cuja importância no desenvolvimento embrionário fica evidenciada pela multiplicidade de defeitos observados em camundongos com deleção desse gene. Os exons do gene PAX9 são bastante conservados entre primatas e não primatas, sugerindo assim, que as influências deste gene nas variações do número de dentes entre espécies e dentro de uma mesma espécie são principalmente associadas a variações na expressão do gene. Com o objetivo de investigar a influência das regiões conservadas nos introns 2 e 3 na atividade transcricional do gene PAX9, o presente projeto consistirá em: ensaio de luminescência, onde fragmentos de DNA com regiões conservadas serão amplificados, clonados, e transfeccionados para células obtidas das regiões odontogênicas da maxila, mandíbula e de tecido neural de embriões de ratos com 13 dias de idade. Após práticas histológicas, e plaqueamento das células, estas serão transfectadas com DNA, cujo material precipitado será removido, e a atividade da luciferase medida; ensaios de mobilidade de DNA para determinação da interação DNA-proteínas nucleares serão feitos, onde fragmentos intrônicos amplificados serão incubados com extrato de núcleo das mesmas regiões e submetidos à eletroforese. O DNA nativo e as bandas com migração retardada serão então analisados.