Maturação in vitro de oócitos ovinos com o uso da Roscovitina e Ciclohexemida

• Processo: 09/03627-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Sony Dimas Bicudo
• Beneficiário: Letícia Ferrari Crocomo
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Cumulus Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cumulus | inibidores da meiose | maturação citoplasmática | maturação nuclear | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

A maturação oocitária in vitro (MIV) é uma importante tecnologia reprodutiva que possibilita a utilização de oócitos coletados de folículos em diferentes estádios de desenvolvimento, que desapareceriam in vivo por subordinação ou atresia. No entanto, em ovinos observa-se que a simples remoção dos complexos oócito-cumulus (COCs) dos folículos e cultivo in vitro em condições adequadas promovem um reinício "espontâneo" da meiose e interrupção da maturação citoplasmática necessária para suportar o posterior desenvolvimento embrionário. Uma estratégia para melhorar o potencial de desenvolvimento do oócito in vitro consiste em bloquear temporariamente a maturação nuclear através da utilização de fármacos inibidores da meiose. Esta pesquisa se propõe a avaliar e comparar a eficácia da Roscovitina e da Ciclohexemida na sincronização da maturação nuclear e citoplasmática. Para isso, COCs de ovários de ovelhas adultas, obtidos em frigorífico, serão cultivados em meio de maturação padrão constituído por TCM 199 suplementado com 0,1UI/mL de FSH, 0,1 UI/mL de hCG, 1µg/mL de estradiol, 0,3 mM de piruvato, 75 µg/mL de estreptomicina, 10 % SFB e 100 µM/mL de cisteamina sem a adição de fármacos (tratamento controle) ou acrescido de 50 ¼M de Roscovitina (tratamento 2) ou 2 ¼g/mL de Ciclohexemida (tratamento 3) por 22-24 horas a 39ºC em 5% de CO2 em ar. A reversibilidade da ação destes fármacos será avaliada pelo posterior cultivo destes COCs em meio de maturação livre de inibidores, nas mesmas condições acima descritas. Após o cultivo in vitro, os COCs serão avaliados quanto à expansão das células cumulus em esteromicroscópio, quanto à maturação nuclear em microscópio de fluorescência e quanto à maturação citoplasmática, de acordo com o padrão de distribuição das organelas citoplasmáticas, em microscopia eletrônica de transmissão.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CROCOMO, Letícia Ferrari. Maturação in vitro de oócitos ovinos com o uso da roscovitina e ciclohexemida. 2011. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Botucatu Botucatu.