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Potencial evocado auditivo relacionado a eventos e análise proteômica e morfológica em córtex auditivo de ratos submetidos a tratamento subcrônico com chumbo: efeito protetor da suplementação com ferro

Processo: 09/09828-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2009
Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Marília Afonso Rabelo Buzalaf
Beneficiário:Josilene Luciene Duarte
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Assunto(s):Chumbo   Estresse oxidativo   Morfologia dentária   Cérebro   Bioquímica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Analise Proteômica | cérebro | Chumbo | Estresse oxidativo | Morfologia | Potencial evocado auditivo | Bioquimica

Resumo

O chumbo (Pb) é um metal pesado detectável em todas as fases do meio inerte e sistema biológico. As principais vias de contaminação são a pele, o trato respiratório e o trato gastrintestinal, sendo que quando absorvido pelo organismo atua em vários órgãos e sistemas. Este metal pode ocasionar alterações no sistema auditivo tanto na porção periférica quanto na porção central. Entretanto, na literatura da área não foram encontrados estudos que correlacionassem as alterações clínicas em conjunto com as alterações bioquímicas e morfológicas em cérebro de ratos expostos ao Pb. Em adição, tem sido relatado que o ferro (Fe) tem um efeito protetor na toxicidade cerebral causada pelo Pb. Portanto, o objetivo deste estudo será avaliar a atividade elétrica cerebral, o perfil proteico e o aspecto morfológico do córtex auditivo de ratos intoxicados por Pb, submetidos simultaneamente à suplementação com Fe ou não. Inicialmente será realizado um projeto piloto utilizando 15 ratos machos recém-desmamados (Rattus norvergicus, variedade Wistar), que serão divididos em 5 grupos de 3 animais cada (1 controle e 4 experimentais). Em dois dos grupos experimentais, os animais receberão 100 mg/L de acetato de Pb na água de beber por 6 semanas, sendo que em um deles haverá administração simultânea de 20 mgFeSO4/Kg peso corporal a cada 2 dias, através de gavagem gástrica, e no outro não. Similarmente, outros 2 grupos receberão a dose de 400 mg/L de acetato de Pb na água de beber por 6 semanas, com administração simultânea de 20 mg FeSO4/Kg peso corporal a cada 2 dias, através de gavagem gástrica, ou não. O grupo controle receberá, pelo mesmo período experimental, água deionizada. Após o período experimental, será realizada a dosagem de chumbo no sangue, pois espera-se que as dosagens de 400 mg/L e 100 mg/L de acetato de Pb administradas na água de beber produza níveis de Pb no sangue em torno de 30 µg/dL e 10 µg/dL, respectivamente. Depois de estabelecida a relação entre o Pb administrado em água e a dosagem deste no sangue, o experimento será realizado utilizando 30 ratos machos recém-desmamados (Rattus norvergicus, variedade Wistar), que serão divididos em 5 grupos de 6 animais cada (1 controle e 4 experimentais), sendo que os procedimentos de administração do acetato de Pb e FeSO4 será o mesmo descrito acima. Após o período experimental será medida a resposta elétrica cerebral do córtex auditivo por meio de eletrodos pré-implantados, com o animal em estado alerta, utilizando o procedimento Potencial Evocado Auditivo Relacionado a Eventos, com a análise dos componentes N1 e P1. Após a eutanásia por decapitação, o cérebro dos animais será removido, sendo que uma parte será submetida à análise proteômica por meio de eletroforese bi-dimensional, e outra parte ao processamento histológico, onde serão obtidos cortes histológicos corados em hematoxilina e eosina e analisados ao microscópio óptico. Os dados serão checados em relação à normalidade e homogeneidade (testes de Kolmogorov; Smirnov e Bartlett, respectivamente), para a seleção do teste estatístico apropriado. O nível de significância adotado será de 5%. (AU)

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Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
DUARTE, Josilene Luciene. Potencial evocado auditivo cortical, análise bioquímica e morfológica em cérebro de ratos submetidos a tratamento subcrônico com chumbo: efeito protetor da suplementação com ferro. 2013. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB) Bauru.