Estudo da maturação in vitro de oócitos caninos em meio seriado de hormônio luteinizante (LH) e progesterona.

• Processo: 09/07346-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Wilter Ricardo Russiano Vicente
• Beneficiário: Tathiana Ferguson Motheo
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Maturação in vitro Maturação Cadelas Oócitos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadela | Maturação | oócito | Maturação in vitro

Resumo

Relativamente ao uso de técnicas de reprodução assistida em canídeos, a maturação e a fertilização in vitro, têm como principal objetivo a preservação do genoma dos canídeos ameaçados em extinção. Entretanto, os meios de cultivo empregados para maturação são adaptações de metodologias adotadas para outras espécies. Inúmeros estudos avaliaram a suplementação dos meios com gonadotrofinas, estrógeno, progesterona, antioxidantes, proteínas e entre outros, porém, nenhum deles releva a ação seriada de hormônios sobre a maturação de oócitos caninos. Deste modo, o objetivo do presente estudo será o de avaliar os efeitos da suplementação seriada do meio de cultura com hormônio luteinizante (LH) e progesterona, em diferentes momentos do período de cultivo in vitro de oócitos caninos. Trinta cadelas, com idade entre 1 a 7 serão selecionadas, por meio de citologia vaginal, análise comportamental, dosagem de progesterona e presença ou não de folículos ou corpo lúteo na superfície ovariana, em GI (Fase folicular) e GII (Anestro). Os ovários serão obtidos durante o procedimento de ovariohisterectomia (OHE) e os oócitos serão classificados de acordo com o proposto por Hewitt & England (1998). Selecionar-se-ão para cultura somente os que apresentarem complexo cumulus-oócito (COC) grau 1 e diâmetro superior a 120 µm. De acordo com o estágio do ciclo estral, os COCs serão divididos em 4 grupos e que em ato contínuo serão cultivados nos seguintes meios: GI (controle: TCM -19), GII (controle e progesterona após 48 horas de maturação), GIII (controle e LH nas primeiras 48 horas de maturação) e GIV (controle e LH nas primeiras 48 horas e progesterona após 48 horas). As amostras serão avaliadas quanto à morfologia do oócito e células do cumulus antes do início do processo de maturação (tempo 0) e após 96 horas de cultivo em atmosfera de 5% de CO2 em ar. Microscopia eletrônica de varredura e de transmissão serão utilizadas para avaliação morfológica do oócito. As características morfológicas do complexo cumulus-oócito de cadelas submetidas à maturação in vitro e a relação das fases do ciclo sobre a morfologia oocitária e competência meiótica serão avaliadas por meio do teste de Qui-quadrado. Nível de significância de 0,05% será adotado.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MOTHEO, Tathiana Ferguson. Maturação in vitro de oócitos caninos: influência da suplementação hormonal seriada sobre a ultraestrutura oocitária. 2013. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Jaboticabal Jaboticabal.