Produção na forma recombinante de fatores de transcrição de Neurospora crassa que regulam o metabolismo de glicogênio e o ciclo celular

• Processo: 10/13179-0
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de março de 2011
• Vigência (Término): 31 de julho de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Celia Bertolini
• Beneficiário: Stela Virgilio
• Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Fatores de transcrição Expressão gênica

Resumo

Utilizando uma coleção de linhagens do fungo Neurospora crassa mutantes em genes que codificam fatores de transcrição, vários fatores de transcrição foram anteriormente identificados no laboratório como envolvidos na regulação do metabolismo de glicogênio. Entre eles, duas proteínas serão objeto de estudo no presente projeto: uma anotada como uma proteína hipotética, sem nenhum estudo de caracterização funcional prévio e uma proteína anotada como transcriptional repressor rco-1 e homóloga à proteína Tup-1 de S. cerevisiae. Em relação à proteína codificada pelo gene rco-1 (regulation of conidiation) estudos prévios com o fungo N. crassa mostraram que a proteína atua como um repressor da expressão de genes relacionados à conidiação. Linhagens mutantes na proteína apresentaram taxa de crescimento reduzida, morfologia das hifas alterada e ausência de conidiação. Os resultados prévios obtidos em nosso laboratório mostraram que as duas proteínas estão envolvidas na regulação do metabolismo de glicogênio no fungo, uma vez que os níveis do carboidrato nas linhagens mutantes mostraram estar alterados, quando comparados à linhagem selvagem. Além disso, a expressão do gene que codifica a enzima glicogênio sintase, regulatória no processo de síntese, também se mostrou alterada em relação a existente na linhagem selvagem. Outro fato bastante interessante é que as linhagens mutantes, em ambas proteínas apresentaram alterações no ciclo celular quando analisado por citometria de fluxo.Considerando os resultados relacionados às proteínas descritas acima, torna-se necessário a padronização das condições para a produção das mesmas na forma recombinante para a realização de experimentos futuros visando a caracterização funcional e estrutural das mesmas, objetivo do presente projeto. É importante salientar que poucos fatores de transcrição de N. crassa foram, até o momento, bem caracterizados ao nível protéico.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

VIRGILIO, Stela. Metabolismo de glicogênio e relógio biológico em Neurospora crassa : fatores e cofatores de transcrição envolvidos nos processos. 2012. 138 f. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Instituto de Quimica..