Estudo do DNA mitocondrial (mtDNA) em culturas de mioblastos provenientes de pacientes com deleções múltiplas do mtDNA

• Processo: 08/11039-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Cláudia Ferreira da Rosa Sobreira
• Beneficiário: Gabriela Luchiari Tumioto
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 05/05204-7 - Deleções múltiplas do DNA mitocondrial: causas e consequências morfológicas, bioquímicas e moleculares no tecido muscular e em cultura de mioblastos, AP.R
• Assunto(s): DNA mitocondrial Transporte de elétrons Neurologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadeia Respiratória | cultura de mioblastos | deleções múltiplas do DNA mitocondrial | DNA mitocondrial | miopatia mitocondrial | oftalmoplegia externa progressiva | Neurologia

Resumo

Propomos o estudo das doenças mitocondriais que surgem pelo desenvolvimento de deleções múltiplas no DNA mitocondrial (mtDNA) através da avaliação de suas causas e conseqüências no âmbito morfológico, bioquímico e molecular, em biópsias musculares e em mioblastos em cultura, visando melhor conhecimento da fisiologia mitocondrial e da fisiopatologia dessas doenças, e o delineamento de propostas terapêuticas eficazes. Como parte do plano de atividades relacionado ao estágio de capacitação técnica incluiremos o estudo das alterações moleculares do mtDNA em culturas de mioblastos de pacientes com miopatia mitocondrial. Nessa etapa ocorrerá o aprendizado para realização de técnicas de contagem de células vivas em suspensão, extração de DNA em culturas celulares, realização de southern blot e dot blot, para determinação do padrão de envolvimento do DNA mitocondrial nas culturas de mioblastos dos pacientes com miopatia mitocondrial e deleções múltiplas do mtDNA, comparando o padrão observado nos pacientes com oftalmoplegia externa progressiva com o daqueles que apresentam manifestação de intolerância ao exercício. Avaliaremos, a seguir, clones isolados de mioblastos, para determinar se o padrão envolvimento varia em diferentes células e qual a interferência de fatores ambientais nessas alterações.