Localização da expressão de SOCS1 e SOCS3 em modelo murino de doença periodontal experimental e determinação de interações físicas destas proteínas com STAT1, STAT3 e NF-kB

• Processo: 11/07296-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Carlos Rossa Junior
• Beneficiário: Caroline Silva Lobo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Doenças periodontais Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular Sinalização intracelular Inflamação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Doenças Periodontais | Inflamação | sinalização intracelular | Periodontia

Resumo

A expressão de citocinas inflamatórias é um processo regulado por mecanismos variados, incluindo o controle da sinalização intracelular e da atividade transcricional por inibidores endógenos, os quais são pouco estudados e compreendidos. Três grupos de proteínas: SHP, PIAS e SOCS inibem de maneira distinta e específica a transdução de sinais pela via JAK/STAT, bem como a atividade dos fatores de transcrição, eventos que modulam a expressão de diversas citocinas. As doenças periodontais estão associadas à inflamação persistente, com elevados níveis de citocinas proinflamatórias, no entanto praticamente não existem informações sobre a participação destes mecanismos de regulação endógenos destes mediadores inflamatórios na doença periodontal. Nossa principal hipótese é que as proteínas SOCS são capazes de interagir fisicamente com STATs e NF-ºB para modular a ativação destes fatores de transcrição, de grande relevância na regulaçnao da expressão e atividades biológicas das citocinas inflamatórias. A hipótese secundária é que a expressão de SOCS1 e -3 nos tecidos periodontais inflamados se co-localiza com o infiltrado inflamatório. Para testar estas hipóteses, propomos os seguintes objetivos específicos:1)-Avaliar os níveis e localização da expressão de SOCS1 e SOCS nos tecidos gengivais durante a doença periodontal experimental. Utilizaremos cortes histológicos de molares superiores obtidos de peças arquivadas em que a doença periodontal foi induzida em ratos por meio de injeção de LPS. O nível de expressão ao longo do período experimental de 30 dias de indução de doença periodontal, bem como sua localização em relação ao infiltrado inflamatório serão determinados por imunoistoquímica.2)-Verificar a interação física de SOCS1/SOCS3 com STAT1/STAT3 e NF-ºB. Para este objetivo, serão realizados experimentos in vitro, utilizando linhagem celular de macrófagos murinos estimlados com LPS. A interação de SOCS1/SOCS3 com as proteínas-alvo STAT1, STAT3 e NF-kB serão avaliados em lisados celulares por meio de experimentos de co-imunoprecipitação e western blot.