Avaliação da pluripotência das células pluripotentes-similes isoladas a partir de tecidos fetais

• Processo: 12/14674-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2012
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Irina Kerkis
• Beneficiário: Damiana Pedro de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/51051-6 - Células-tronco adultas versus células tronco pluripotentes induzidas, AP.TEM
• Assunto(s): Biologia celular Células-tronco embrionárias Pluripotência Embriogênese Reação em cadeia por polimerase (PCR) In vivo Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células tronco | células tronco embrionárias | pluripotência | tecido fetal | células tronco

Resumo

Células no estágio de pluripotência apresentarem a capacidade de auto renovação e diferenciam em todos os tipos celulares do embrião. A pluripotência pode ser demonstrada através de diversos ensaios experimentais in vitro e in vivo como: expressão de marcadores específicos de pluripotência (oct3/4 e nanog), capacidade de diferenciar em todos os tipos celulares das três camadas germinativas e contribuição na formação do camundongo chimerico. As células tronco pluripotentes (CTP) podem ser isoladas in vitro a partir das fases iniciais do desenvolvimento embrionário como: a massa celular interna do blastocisto (MCI) e do epiblasto de embriões pré-implantados de camundongos. Em experiências recentes, isolamos células tronco pluripotentes- símiles (CTPs) a partir de tecidos fetais, assim podemos dizer que é possível isolar CPTs a partir de estágios tardio do desenvolvimento. Sabe-se, que as células-tronco (CT), isoladas de TF apresentam propriedades mais primitivas do que as homologas adultas, com alto potencial de expansão in vitro, expressão de marcadores de pluripotência e ausência de tumorogenicidade. O isolamento de CTPs em fases subsequentes do desenvolvimento fetal até o presente não foi investigado. Com base nestes recentes achados, o presente projeto objetiva avaliar a expressão de marcadores de pluripotência (oct3/4 e nanog) CTPs isoladas a partir do encéfalo de fetos a fim de confirmar a pluripotencialidade destas células. Para isto serão utilizados fetos de camundongos com 12, 15 e 18 dias de gestação para o isolamento in vitro das CTPs. A expressão será avaliada através da técnica de imunocitofluorescência e PCR. O estudo irá fornecer informações relevantes sobre condições de isolamento de CTP bem como, o mecanismo de manutenção da pluripotencialidade e de diferenciação in vitro.(AU)