Viabilidade pós-natal, em camundongos, de agregados de embrião fertilizado in vivo com partenotos

• Processo: 14/12586-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Embriologia
• Pesquisador responsável: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
• Beneficiário: Bruna Martins Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
• Assunto(s): Fertilização Transferência de embriões Micromanipulação Quimera In vivo Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ativação Partenogenetica | embrião pré-implantação | imprinting materno | Mus musculus | quimerismo por agregação | Transferência embrionária | Micromanipulação Embrionária

Resumo

Quimeras oriundas de células fertilizadas in vivo com células de origem partenogenética têm sido estudadas e aplicadas na biotecnologia da reprodução. Partenotos de camundongos não se desenvolvem a termo, porém a agregação com embriões oriundos de fertilização torna isso possível. Todavia, as células partenogenéticas afetam o crescimento e o desenvolvimento do embrião e futuro neonato. Este trabalho tem como objetivo analisar a viabilidade pós-natal de quimeras produzidas por meio da agregação de um embrião fertilizado in vivo da linhagem C57BL/6 EGFP (EGFP) com dois embriões ativados partenogeneticamente da linhagem Swiss Webster. Para isso, embriões de camundongos em estágio de pré-compactação terão a zona pelúcida removida, serão tratados com um agente aglutinador (fitohemaglutinina) e serão aproximados em micropoços individuais (sistema de cultivo Well of the Well - WOW) visando à agregação por contato físico. Os conjuntos a serem agregados serão incubados in vitro por 48 horas, até atingir o estágio de blastocisto. Para a avaliação da agregação e a análise da localização das células, será utilizada a fluorescência, proveniente das células da linhagem EGFP. Os embriões que apresentarem a localização das células partenogenéticas na massa celular interna serão transferidos para receptoras pseudogestantes. Os neonatos serão analisados quanto ao peso médio, à taxa de nascimento, à mortalidade pós-natal, à porcentagem de células partenogenéticas na pelagem e, se possível, comportamento reprodutivo das quimeras adultas.