Análise Molecular do Tráfego Intracelular do Canal para Prótons Sensível a Voltagem por Microscopia de Fluorescência

• Processo: 16/16346-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Manoel de Arcisio Miranda Filho
• Beneficiário: Luísa Ribeiro Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Exocitose Fisiologia molecular Microscopia de fluorescência Endocitose
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: canal de prótons sensível a voltagem | Endocitose | Exocitose | Microscopia de Fluorescência | Fisiologia Molecular

Resumo

O canal para prótons dependente de voltagem (HV1) apresenta um papel importante durante a morte de micróbios por fagócitos, como neutrófilos e micróglia. Além de suas funções fisiológicas, estudos recentes tem demonstrado a participação desse canal em situações patológicas, tanto aumentando o dano tecidual em derrame isquêmico, quanto promovendo a proliferação e sobrevivência de células tumorais (Ribeiro-Silva et al. 2016; Wu et al. 2012). Apesar de esses processos patológicos estarem associados com uma maior expressão superficial do canal HV1, pouco se sabe sobre os mecanismos celulares e moleculares que determinam sua abundância na membrana plasmática.A expressão superficial de canais iônicos é definida, principalmente, por três processos; a síntese de proteínas, a exocitose e endocitose do canal na membrana plasmática, e a degradação da proteína. Esses processos são finamente regulados e dependem muitas vezes de sinais contidos nos domínios intracelulares dos canais iônicos.O presente projeto de pesquisa propõe investigar os mecanismos moleculares da expressão superficial do canal para prótons dependente de voltagem, associando alterações em seu domínio C-terminal com sua localização intracelular. Por meio de técnicas de microscopia de fluorescência e biologia molecular pretendemos identificar a via secretória e endocítica utilizada pelo canal Hv1, e a relevância do seu domínio C-terminal para seu transporte.