| Processo: | 18/26151-9 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Data de Início da vigência: | 01 de fevereiro de 2019 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2021 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Biofísica - Radiologia e Fotobiologia |
| Pesquisador responsável: | Vadim Viviani |
| Beneficiário: | Gabriel Felder Pelentir |
| Instituição Sede: | Centro de Ciências e Tecnologias para a Sustentabilidade (CCTS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). Sorocaba , SP, Brasil |
| Vinculado ao auxílio: | 10/05426-8 - Bioluminescência de artrópodes: diversidade biológica em biomas brasileiros; origem bioquímica; evolução estrutural/funcional de luciferases; diferenciação molecular das lanternas; aplicações biotecnológicas, ambientais e educacionais, AP.TEM |
| Assunto(s): | Lampyridae Luciferases Luciferina Mutagênese sítio-dirigida Técnicas biossensoriais |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Amydetes | Bioensaios ATP | Biosensor | luciferases | Bioluminescência e Biofotonica |
Resumo As luciferases de vagalumes lampirídeos emitem luz na região do verde-amarelo e seus espectros são sensíveis ao pH e metais pesados. Nas últimas décadas as luciferases de vagalumes têm sido intensivamente usadas em bioanálises de ATP, viabilidade celular, ensaios enzimáticos, e seus genes têm sido empregados como os genes repórter mais populares para estudar expressão gênica, biossensores e bioimagem. Recentemente, nosso grupo identificou o sitio de ligação de metais e o mecanismo de sensibilidade ao pH nestas luciferases, permitindo a engenharia dos sítios de ligação e iniciar a desenvolver luciferases com diferentes sensibilidades espectrais a diferentes metais. A luciferase de Amydetes vivianii é a luciferase com o espectro mais deslocado para o azul (539 nm) entre as luciferases pH-sensitivas, exibindo a menor sensibilidade ao pH. Por esta razão, esta enzima constitui um bom ponto de partida para desenvolver luciferases sensoras mais específicas de metais e pH. Assim, neste projeto realizaremos mutagênese sitio-dirigida da região sensora de pH, caracterizaremos a sensibilidades ao pH e a diferentes metais como cádmio e mercúrio, as cinéticas destes mutantes, e finalmente serão obtidas curvas-padrão de ATP para utilizar estas luciferases para análise simultânea de concentração de metais e ATP intracelulares. | |
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