Capacitação em técnicas para cuidado, manutenção e reprodução de linhagens transgênicas de camundongos Cre-LoxP

• Processo: 21/00335-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Neuropsicofarmacologia
• Pesquisador responsável: Sabrina Francesca de Souza Lisboa
• Beneficiário: Marisa Xavier Manço
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/19731-6 - Identificação de mecanismos epigenéticos induzidos por estresse que modulam a sinalização endocanabinóide e a resposta neuroimunológica como novos alvos farmacológicos no tratamento do transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), AP.JP
• Assunto(s): Camundongos transgênicos Técnicas de genotipagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: camundongos transgênicos | Cb1Trpv1 | Cre-LoxP | Técnicas de genotipagem

Resumo

O objetivo do projeto é capacitar o bolsista para manutenção de camundongos transgênicos, e de técnicas laboratoriais, como extração de DNA, reação de PCR e eletroforese em gel de agarose. Duas tarefas específicas e complementares serão de responsabilidade do bolsista: (i) capacitação sobre normas de segurança e cuidados na manipulação de animais; (ii) genotipagem dos animais.Plano de trabalho: O bolsista será responsável por manter o biotério nas condições ideais (segundo as normas do comitê de ética) de limpeza, iluminação e umidade, além dos cuidados com os animais: distribuição e limpeza das caixas, manutenção de água e comida, reprodução e sexagem. Será estabelecida uma rotina onde as tarefas acima descritas serão distribuídas durante a semana. Inicialmente o bolsista receberá treinamento e capacitação inicial sobre as normas de biossegurança do laboratório e sobre o uso e manipulação de animais de experimentação.Genotipagem: O bolsista será responsável pelo cruzamento de camundongos transgênicos (formação de casais e troca das caixas), coleta de amostras, extração de DNA, reação de PCR e eletroforese em gel de agarose. Após a realização de todas essas etapas, será possível a identificação do genótipo dos animais transgênicos. Tarefas como: preparo de soluções, processamento de tecidos coletados para a realização de diversas, além de participar das discussões científicas do laboratório, também farão parte da rotina do bolsista.Justificativa: Recebemos doação de algumas linhagens de camundongos transgênicos que serão essenciais para o projeto Jovem Pesquisador. O Dr. Carsten T Wotjak, do Instituto Max Planck de Psiquiatria de Munique, nos doou as linhagens TRPV1ff, Camk-CB1, CB1ff e CB1 KO. Estes animais nos permitirão investigar a contribuição dos receptores CB1 e TRPV1 de diferentes populações celulares, em diferentes estruturas, na modulação de respostas comportamentais ao estresse. A bolsa de TT-3 será importante para o cuidado e manutenção do biotério e dos animais, parte essencial para o andamento de todas as outras etapas dos projetos.