Construção e validação de plasmídeos mais eficientes para a produção de proteínas recombinantes em Escherichia coli

• Processo: 21/02958-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Flavio Henrique da Silva
• Beneficiário: Thais Fernanda Carlos
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/26070-1 - Modulação da película adquirida do esmalte e do biofilme para o controle da perda mineral dentária: desvendando mecanismos e possibilitando terapias, AP.TEM
• Assunto(s): Biotecnologia Proteínas recombinantes Plasmídeos Cana-de-açúcar Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cana-de-açúcar | cistatina | Cisteíno Protease | Maqui | proteína recombinante | Proteína Recombinante

Resumo

Os estudos estruturais e funcionais de proteínas requerem quantidades consideráveis delas, e utilizando de sistemas de produção recombinante é possível contornar problemas causados pela pouca quantidade de proteína purificada a partir de sua fonte natural. A expressão heteróloga de proteínas de interesse biotecnológico pode trazer inúmeros benefícios para a medicina, indústria farmacêutica, alimentícia, agrícola, química, etc. No entanto, nem sempre o rendimento da produção atende a demanda da indústria. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho é desenvolver plasmídeos mais eficientes para a produção de proteínas recombinantes, alterando códons na região 5' da fusão oriunda do plasmídeo pET28, resultando em alteração N-terminal da proteína expressa, de forma a aumentar o rendimento da produção. Como proteínas modelos será utilizada uma fitocistatina oriunda da cana-de-açúcar, a qual já é produzida e caracterizada em nosso laboratório, e uma do arbusto Maqui, uma berry nativa da América do Sul. Desta forma, com a realização deste projeto, pretende-se disponibilizar plasmídeos mais eficientes na produção de proteínas recombinantes, e como consequência, obter um sistema mais eficiente para a produção das proteínas supracitadas, as quais possuem grande potencial biotecnológico. (AU)