Efeito do meio condicionado de células-tronco da papila apical na sobrevivência de monócitos de sangue periférico in vitro

• Processo: 22/05303-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Carla Renata Sipert
• Beneficiário: Rafael Victor Albuquerque de Abreu
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Metabolismo ósseo Células-tronco Osteoclastogênese Reabsorção óssea Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células-tronco da papila apical | Metabolismo Ósseo | Osteoclastogênese | Reabsorção óssea

Resumo

Reabsorções ósseas e radiculares estão entre as principais causas de perdas dentárias. Procedimentos endodônticos regenerativos têm sido propostos como alternativa ao tratamento da reabsorção radicular externa. Monócitos são os precursores dos osteoclastos e são considerados células centrais neste contexto. Células-tronco da papila apical (SCAP) estão em contato íntimo com o osso ao longo da formação radicular e podem desempenhar algum papel no metabolismo ósseo. Este estudo tem o objetivo de investigar o potencial de meio condicionado de SCAP na sobrevivência in vitro de monócitos. Culturas primárias de SCAP serão estabelecidas para a obtenção de meio condicionado (CM). Monócitos de sangue periférico humano serão isolados e cultivados. Estas células serão cultivadas com CM ou meio apenas sendo eles adicionados de M-CSF e RANKL por 7, 14 e 21 dias. Para cada tempo, a citotoxicidade será avaliada por meio de ensaio de MTT [(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide)]. Em seguida, monócitos serão submetidos a dUTP nick end labeling (ensaio TUNEL) em determinados tempos experimentais. Finalmente, o sobrenadante de SCAP será quantificado em relação a osteoprotegerina, interleucina-33 and TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL). A análise estatíscia será realizada por meio de ANOVA ou teste Kruskal Wallis (p<0.05).