Estabelecimento de um modelo in vitro de biofilme bacteriano/fúngico composto por Streptococcus pyogenes e Candida albicans.

• Processo: 22/09156-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Clínica Odontológica
• Pesquisador responsável: Douglas Roberto Monteiro
• Beneficiário: Amanda Munarolo Piacenza de Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências da Saúde (FCSA). Universidade do Oeste Paulista (UNOESTE). Presidente Prudente , SP, Brasil
• Assunto(s): Tonsilite Biofilmes Candida albicans Candidíase Streptococcus pyogenes Microbiologia aplicada
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Amigdalite | Biofilmes | Cândida Albicans | Candidíase | Modelos de biofilme | Streptococcus pyogenes | Microbiologia aplicada

Resumo

O objetivo do presente estudo é estabelecer um modelo in vitro de biofilme misto de Streptococcus pyogenes e Candida albicans, determinando as condições ideais para a sua formação. Os biofilmes mistos serão formados por 48 horas sobre discos de vidro posicionados verticalmente no Amsterdam Active Attachment model. Diferentes fatores de variação serão avaliados, incluindo o meio de cultura (Brain Heart Infusion caldo ou saliva artificial), a película salivar humana (presente ou ausente) na superfície dos discos de vidro previamente à formação de biofilmes e a sequência de inoculação dos microrganismos (inoculação de S. pyogenes seguida de C. albicans, inoculação de C. albicans seguida de S. pyogenes ou inoculação das duas espécies ao mesmo tempo), gerando 12 modelos diferentes de formação de biofilmes. Os biofilmes resultantes serão analisados pela contagem das unidades formadoras de colônias (usando meios de cultura específicos), quantificação da biomassa total (usando o ensaio de coloração com violeta cristal) e atividade metabólica (ensaio de redução do XTT). A microscopia eletrônica de varredura e a microscopia confocal de varredura a laser serão utilizadas para analisar a ultraestrutura dos biofilmes resultantes. Além disso, biofilmes simples das duas espécies serão testados como controles. Todos os testes microbiológicos serão realizados em triplicata, em três ocasiões diferentes. Os dados serão submetidos aos testes de normalidade e homocedasticidade e, a seguir, será aplicada análise estatística adequada para cada resultado, com nível de significância de 5%.