Desenvolvimento de vacina injetável para controle de Mycoplasma hyopneumoniae em suínos utilizando a sílica nanoestruturada SBA-15 como adjuvante

• Processo: 21/14515-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2022
• Data de Término da vigência: 02 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
• Pesquisador responsável: Luís Guilherme de Oliveira
• Beneficiário: Fernando Antônio Moreira Petri
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/15067-5 - Comunicação entre a diversidade microbiana no trato respiratório de suínos e a resposta a vacina experimental e comercial contra Mycoplasma hyopneumoniae, BE.EP.DD
• Assunto(s): Suínos Pneumonia suína micoplasmática Resposta imune Nanotecnologia Vacinologia Abate Mycoplasma hyopneumoniae Vacinas Sílica mesoporosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Doença respiratória | lesões ao abate | Nanotecnologia | pneumonia enzootica suína | resposta imune | Vacinologia | Medicina de suínos

Resumo

Mycoplasma hyopneumoniae, principal agente etiológico da Pneumonia Enzootica Suína (PES), é um microrganismo amplamente difundido na suinocultura intensiva cuja prevenção é de grande interesse para o sistema de produção brasil, já que sua colonização no tecido pulmonar leva a intensas perdas produtivas. As vacinas comerciais disponíveis minimizam as lesões pulmonares e os sinais clínicos, mas não impedem a colonização do trato respiratório e a excreção do patógeno. O desenvolvimento de novas tecnologias é um grande aliado à saúde animal e à produção intensiva, como é o caso da sílica mesoporosa SBA-15, utilizada como carreador-adjuvante, servindo como um substituto a tecnologias existentes, como o hidróxido de alumínio. Sendo assim, este projeto visa desenvolver uma vacina parenteral, de administração intramuscular, composta de proteínas celulares de M. hyopneumoniae (cepa 232) incorporadas à sílica SBA-15, servindo como adjuvante e carreadora. Para a execução deste estudo, 45 leitões com 21 dias de idade serão divididos em 3 grupos experimentais com diferentes protocolos de imunização, onde G1: leitões vacinados com vacina comercial de dose única aos 24 dias de idade (D0) pela via intramuscular; G2: leitões vacinados com a vacina injetável preparada (SBA-15), aos 24 dias de idade (D0) pela via intramuscular; G3: grupo controle, receberá SBA-15 sem incorporação do antígeno em solução de PBS (pH 7.4) em D0. Vinte e um dias após a administração da dose vacinal, os animais serão desafiados com 106 CCU/ml de M. hyopneumoniae (232) pela via orotraqueal (D21). A pesagem e exame físico dos animais, colheita de amostras de sangue e suabe nasal e laríngeo serão feitas em D-2, antes da vacinação dos animais. Após a vacinação, será feito exame físico e avaliação do local de aplicação da vacina em todos os animais em D1, D2 e D3. A cada 7 dias, entre D0 e D56, será feito exame físico, a pesagem para cálculo do ganho de peso diário (gpd) e aferição de temperatura. Ainda, será feita colheita de soro sanguíneo e suabe nasal de todos os animais, para detecção de IgG e IgA, respectivamente. Amostras de sangue serão colhidas em D2, D7, D14, D35 e D56 utilizadas para avaliar a expressão de determinadas citocinas inflamatórias (IL-8, IL-17, TGF-² e TNF-±) por qPCR. Após o desafio dos animais em D21, a cada 7 dias até D49, será feito exame físico com observação para início e final dos sinais clínicos de tosse e espirro e, a colheita de suabes nasal e laríngeo para monitoramento do nível de IgA e de excreção de M. hyopneumoniae, respectivamente, em todos os animais. A avaliação pelo Índice para Pneumonia (IPP) e a colheita de fragmentos de pulmão e de lavado traqueobrônquico (LTB) será realizada durante a necropsia dos animais, que acontecerá aos 80 dias de vida dos animais (D56). Amostras de LTB serão utilizadas para detecção do patógeno por qPCR. Fragmentos de pulmão serão submetidos à análise histopatológica. A normalidade e homocedasticidade das variáveis serão verificadas pelos testes de Shapiro-Wilk e Bartllett, respectivamente. Caso sejam atendidos aos pressupostos, serão aplicados a análise de variância (ANOVA) e o teste de Tukey para a comparação múltipla. Caso não haja normalidade, serão utilizados testes não-paramétricos (Kruskal-Wallis). Para avaliar a correlação entre lesões sugestivas da infecção por M. hyopneumoniae e as variáveis investigadas, serão realizados os testes de correlação de Pearson ou de Spearman e a análise de regressão. Por fim, espera-se que os resultados obtidos com o uso da sílica (SBA-15) em vacina parenteral contra M. hyopneumoniae possibilite uma resposta imunológica capaz de auxiliar no controle da doença em suínos, e consequentemente, diminuição da ocorrência de lesões em carcaças durante o abate. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PETRI, FERNANDO ANTONIO MOREIRA; MALCHER, CLARISSE SENA; MECHLER-DREIBI, MARINA LOPES; PANNEITZ, ANA KAROLINA; BRAGA, EDUARDA RIBEIRO; DE AGUIAR, GABRIEL ALEXANDRE; TOLEDO, LEONARDO TEOFILO; MARTINS, TEREZA SILVA; CIDES-DA-SILVA, LUIS CARLOS; FANTINI, MARCIA C. A.; et al. Shedding reduction and immunity modulation in piglets with an inactivated Mycoplasma hyopneumoniae vaccine encapsulated in nanostructured SBA-15 silica. Vaccine, v. 42, n. 24, p. 12-pg., 2024-08-28. (21/11914-0, 21/14515-9, 19/08582-5, 23/15067-5, 19/07007-7, 17/17844-8)