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Transformação gênica e acúmulo das cadeias do anticorpo monoclonal humano adalimumabe em Chlamydomonas reinhardtii.

Processo: 22/15451-7
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2023
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Lívia Seno Ferreira Camargo
Beneficiário:Ednilson Donisete de França Junior
Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:16/12992-6 - Chlamydomonas reinhardtii como plataforma de produção de biofármacos de interesse nacional, AP.JP
Assunto(s):Biofármacos   Chlamydomonas reinhardtii   Proteínas recombinantes
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:anticorpo monoclonal humano | Biofármaco | Chlamydomonas reinhardtii | porteíuna terapêutica | proteína recombinante | Biotecnologia de Microalgas

Resumo

As técnicas de edição genética possibilitaram que diversas proteínas pudessem ser expressas de forma heteróloga. Atualmente muitas proteínas/peptídeos já foram produzidas de forma recombinante, utilizando vetores como: bactérias, leveduras, células de mamíferos, células de insetos e plantas. Os medicamentos biológicos recombinantes complexos usufruem apenas de uma parcela destas possíveis plataformas, havendo predominância do uso de células de mamíferos no cenário de produção atual. Esta limitação está altamente associada com a complexidade estrutural e a compatibilidade necessária em uma proteína para fim terapêutico. Apesar de células animais contornarem estes problemas, estas podem apresentar alto custo em manutenção/produção com uma eficiência de expressão baixa. Deste modo, é importante o estudo de plataformas alternativas que sejam capazes de competir produzindo biomoléculas proteicas complexas de forma eficiente. A microalga Chlamydomonas reinhardtii vem sendo bastante estudada na área de engenharia genética, apresentando características que impactam no custo de produção, nível de expressão recombinante e escalonamento. Entre estas características temos a capacidade fotossintética, o crescimento acelerado, baixo custo de cultivo, alta ploidia do plastoma, existência de elementos reguladores endógenos de alta expressão, capacidade de realizar modificações pós-traducionais e outros. Neste projeto temos como objetivo a transformação genética do genoma do cloroplasto de C. reinhardtii para expressão de um ou dois vetores de expressão ao mesmo tempo, contendo cadeias ou toda a sequência do anticorpo adalimumabe, permitindo a comparação da expressão destas cadeias e do anticorpo montado, sob regulação dos promotores psbA ou psbD. O adalimumabe, um anticorpo monoclonal humano complexo inibidor do fator de necrose tumoral, está presente na Relação Nacional de Medicamentos Essenciais de 2022 (Rename), instrumento utilizado pelo Sistema Único de Saúde (SUS) para controle de patologias no Brasil. A modificação genética e os dados de expressão das cadeias recombinantes serão obtidos aplicando técnicas de biologia molecular, como: PCR, digestão enzimática, técnicas de clonagem, SDS-PAGE e western blotting.

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