Expressão de genes associados ao metabolismo da parede celular e da membrana citoplasmática de Streptococcus mutans e a importância de genes selecionados na morfologia desta espécie

• Processo: 23/03926-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Marlise Inêz Klein Furlan
• Beneficiário: Fernanda Soares Andrade
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06801-1 - Matriz extracelular: da sua biologia às estratégias para o controle de biofilmes cariogênicos, AP.JP2
• Assunto(s): Cárie dentária Parede celular Streptococcus mutans Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carie | glucosiltransferase | membrana citoplasmática | Parede celular | Streptococcus mutans | Microbiologia Oral

Resumo

Um dos objetivos do Auxílio à Pesquisa-Jovem Pesquisador 2, FAPESP 2021/06801 é determinar como a remodelagem da parede celular e da membrana citoplasmática de Streptococcus mutans (espécie modelo produtora de matriz) afeta a interconexão dos componentes da matriz e a sua configuração (criação de micronichos), associada à virulência dessa espécie. Portanto, este projeto de iniciação científica analisará a expressão de genes associados ao metabolismo da parede celular e da membrana citoplasmática de S. mutans e a importância de genes selecionados na morfologia celular desta espécie. Para tanto, a cepa parental S. mutans UA159 e as cepas com deleção de genes específicos associados à síntese de glucanos (DgtfB, DgtfC, DgtfBC), metabolismos de ácidos lipoteicóicos (DdltA, DdltD) e remodelagem da membrana citoplasmática (DlytT, DlytS) serão cultivadas até o início da fase de crescimento logarítmico, seguido de "pulso" com glicose ou sacarose. Em seguida, uma alíquota dessas culturas será processada para a análise por microscopia eletrônica de transmissão (MET) para avaliar a morfologia celular. Os remanescentes dessas culturas serão processados para separar o sobrenadante e o precipitado (células mais componentes na parte externa das células, i.e., glucanos). O sobrenadante será utilizado para analisar o pH do meio de cultivo. O precipitado será utilizado para o isolamento de RNA, seguido da síntese de cDNA e reações de quantitativas de PCR para determinar o nível de expressão de genes selecionados. As imagens de MET serão analisadas descritivamente. Os dados quantitativos serão analisados via estatística descritiva e inferencial (±=0,05). As alterações nos parâmetros avaliados poderão explicar como eles afetam a biologia da parede celular e da membrana celular de S. mutans.