Caracterização funcional do miR-184 na próstata de ratos submetidos a má-nutrição materna. Potencial participação na origem desenvolvimentista do câncer de próstata

• Processo: 23/01714-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Luis Antonio Justulin Junior
• Beneficiário: Renato Mattos
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/16116-0 - Estudando o microambiente do tumor pancreático e tecnologias de edição genética, BE.EP.MS
• Assunto(s): Neoplasias Epigenômica MicroRNAs Próstata Reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | DOHaD | epigenética | miRNA | Próstata | Biologia da Reprodução

Resumo

A abordagem DOHaD (Origem Desenvolvimentista Da Saúde e da Doença) busca estabelecer a correlação entre a incidência de doenças na vida adulta e no envelhecimento perante os eventos sofridos durante o início do desenvolvimento. Um de seus modelos mais utilizados para estudos de DOHaD é a submissão de roedores a restrição proteica materna (RPM). Estudos experimentais já demonstram que ela é responsável por inibir o desenvolvimento da próstata e aumentar a incidência de Câncer de Próstata (CaP) com o envelhecimento. Uma das principais consequências desses eventos são as alterações epigenéticas que acompanham a prole ao longo da vida, como RNAs não codificantes e os microRNAs. Recentemente, nosso grupo de pesquisa vem se dedicando a compreender de maneira global os mecanismos moleculares e epigenéticos de alterados na próstata de animais submetidos à RPM. Assim, o objetivo desse trabalho será analisar o papel funcional do miR-184 (previamente selecionados a partir de análises de bioinformática) na próstata ventral (PV) de animais no dia pós-natal (DPN) 21 que foram submetidos à RPM. Para isso, iremos utilizar dados do sequenciamento de miRNAs (GSE180673) e mRNAs (GSE180674) da PV de ratos Sprague Dawley que foram divididos em dois grupos experimentais: grupo CTR (controle, com dieta a 17% de proteína, n=6) e GLLP (restrição proteica na gestação e lactação, dieta a 6%, n=6), e que foram eutanasiados no DPN21. Esses dados fazem parte do banco de dados do nosso grupo de pesquisa (gerados no processo FAPESP 2017/01063-7). A partir dos dados de sequenciamento de small RNA sequence identificamos os miRNAs diferencialmente expressos (DE), realizamos predição de alvos, comparamos aos dados de sequenciamento de mRNAs da PV desses animais e selecionamos o miR-184 para ser validado e caracterizado funcionalmente em células prostáticas. As validações acontecerão por meio de RT-qPCR na PV dos animais no DPN21. Além disso, também iremos realizar ensaios funcionais em células prostáticas benignas e tumorais (PNT2, LNCaP e PC3) tratadas com miméticos do miR-184, onde serão avaliados a expressão do miRNA, bem como ensaios de viabilidade e migração celular. Com esse trabalho, esperamos identificar o papel do na modulação de miRNAs na PV dos animais submetidos a RPM e seu papel funcional para células prostáticas.