Investigação de genes que codificam as bombas de efluxo em biofilmes e células persisters de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii

• Processo: 23/11855-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Ana Marisa Fusco Almeida
• Beneficiário: Gabriel Rezende Pimenta
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Biofilmes Cryptococcus Resistência Micologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biofilme | bombas de efluxo | Cryptococcus | Persisters | Resistência | Micologia

Resumo

Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são as leveduras encapsuladas causadoras da criptococose. A criptococose é uma doença fúngica sistêmica caracterizada clinicamente por acometer indivíduos imunocomprometidos (C.neoformans) e saudáveis (C.gattii), afetando a via respiratória inferior e posteriormente o sistema nervoso central (SNC). O tratamento antifúngico é agressivo, tóxico e pode ser ineficiente. Neste contexto, a resistência aos fármacos antifúngicos dificulta o tratamento dessas infecções, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Dentre os mecanismos de resistência dos fungos destaca-se a formação de biofilmes e a produção de bombas de efluxo (proteínas transmembranas). Alguns fatores têm sido propostos para a resistência de biofilmes aos antifúngicos, como: sequestro de fármacos por componentes da matriz, regulação positiva das bombas de efluxo de drogas e presença de células persisters (persistentes; tolerantes). Serão avaliados os genes de bombas de efluxo dos antifúngicos em biofilmes e células persisters de C. neoformans e C. gattii para o delineamento de novos alvos específicos para estirpes resistentes oriunda destes biofilmes. A metodologia abordará: a avaliação comparativa da expressão quantitativa dos genes de bombas de efluxo AFR1, AFR2, AFR3, PDR6, MDR1, CDR1 e CDR2 na cinética de formação dos biofilmes (com e sem inibidores de bomba de efluxo) e em células persisters (com e sem antifúngicos), por meio de RT-qPCR; a caracterização do matrixioma (componentes totais da matriz extracelular) na cinética de formação destes biofilmes com e sem os inibidores selecionados, comparando os fenótipos das duas espécies; a indução, a identificação e a avaliação da concentração inibitória mínima das células persisters.