Análise histológica dos efeitos tóxicos de formulações comerciais de anestésicos tópicos odontológicos em modelo de membrana corioalantóica (CAM) de embrião de galinha

• Processo: 23/13866-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Michelle Franz Montan Braga Leite
• Beneficiário: Isabella França Quadrado
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Toxicidade Anestesiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anestésicos tópicos | Het-Cam | membrana corioalantóica de embrião de galinha | método alternativo ao uso de animais de laboratório | Odontologia | Toxicidade | Anestesiologia

Resumo

A dor sempre esteve presente na Odontologia e é um dos fatores primordiais dificultantes na realização de diferentes tratamentos clínicos. A anestesia local é uma técnica que permite a realização desses procedimentos de maneira indolor, entretanto, paradoxalmente, a dor da inserção da agulha e da injeção da solução para sua administração são principais fontes de estresse e ansiedade para os pacientes odontológicos. Portanto, o aprimoramento de técnicas que contribuam para o desenvolvimento de novos anestésicos tópicos é essencial para prover maior conforto ao paciente, tendo em vista que as formulações disponíveis comercialmente não apresentam eficácia de 100% em eliminar o desconforto desta técnica. A utilização de animais em pesquisas vem sendo cada vez mais questionada. Com isso, surgiu o desenvolvimento de métodos alternativos de pesquisas, como o método HET-CAM, que utiliza a membrana corioalantóica de ovos de galinha para testes toxicológicos. Na dissertação de mestrado defendida pelo aluno Arthur Antunes Bezerra Costa (defesa em agosto-2023) foi demonstrado que o modelo HET-CAM é viável para análise de toxicidade de anestésicos tópicos de uso odontológico comerciais. Entretanto, o modelo ainda deverá ser validado, o qual será realizado durante o doutorado do mesmo aluno. Dentre os ensaios que deverão ser realizados no processo de validação metodológica, foi proposto a análise histológica das membranas submetidas à exposição das formulações comerciais. Desta forma, o objetivo deste estudo é avaliar se essa análise microscópica é necessária como complemento do modelo in vivo realizado em método HET-CAM para avaliar a toxicidade de formulações comerciais de anestésicos de uso tópico odontológico. O ensaio de toxicidade (experimentos concluídos durante o mestrado mencionado)foi realizado de acordo com o protocolo nº 96 do European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM), nomeada: Hen's Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HET-CAM). As membranas expostas aos tratamentos (controles e anestésicos tópicos comerciais) foram removidas dos ovos e encontram-se imersas em formalina tamponada a 10%, para a confecção de lâminas histológicas proposta neste projeto de IC. Serão averiguadas a integridade das camadas da membrana corioalantóica e de seus vasos sanguíneos, e a presença de trombos intravasculares e extravasculares. Os achados histológicos serão comparados àqueles obtidos com os resultados do método HET-CAM. Este estudo faz parte de um estudo em andamento que visa validar o uso deste método alternativo ao uso de animais de laboratório para substituir o teste de irritação da mucosa oral em hamsters é o método padrão-ouro recomendado pela International Organization for Standardization - ISO e descrito no protocolo ISO 10993-10:2010 que é preconizado para avaliar toxicidade de formulações tópicas de uso na cavidade bucal, dentre elas, anestésicos tópicos de uso odontológico.