Características metabólicas de linfócitos em ratos diabéticos goto-kakizaki e wistar obesos com Tumor de Walker 256

• Processo: 23/12318-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2028
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia
• Pesquisador responsável: Renata Gorjao
• Beneficiário: Maria Janaina Leite de Araújo
• Instituição Sede: Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa. Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Carcinoma Obesidade Resistência à insulina Imunometabolismo Carcinoma 256 de Walker Linfócitos Modelos animais de doenças
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinoma | obesidade | resistência a insulina | Vias Metabólicas | Imunometabolismo

Resumo

Os linfócitos sofrem reprogramação metabólica em condições inflamatórias geradas por doenças crônicas, sistêmicas e metabólicas, na tentativa de ofertar ao organismo uma resposta imune efetiva. No ambiente tumoral, as células cancerígenas competem com os linfócitos para obtenção de glicose e glutamina, suprimindo o aporte de energia de células T e prejudicando sua função efetora. A reprogramação metabólica sofrida por linfócitos em condições de obesidade e diabetes mellitus tipo 2 pode prejudicar sua resposta imune à tumores, gerando aumento da progressão tumoral na presença destas comorbidades. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar o perfil metabólico de linfócitos durante a progressão do tumor de Walker 256 em ratos Wistar obesos, em comparação aos ratos Goto-Kakizaki (GK), diabéticos tipo 2 sem obesidade. Inicialmente, animais Wistar e GK com 6 semanas serão divididos em 6 grupos, sendo 2 grupos de ratos GK, que receberão dieta balanceada, e 4 grupos de ratos Wistar, onde 2 grupos receberão dieta hiperlipídica e hipersacarídica para indução da obesidade, e 2 deles receberão dieta balanceada (controle). Posteriormente, realizaremos a inoculação das células tumorais nos animais, utilizando 2x107 células da linhagem Walker 256. Avaliaremos a progressão do tumor em animais GK magros, Wistar obesos e não obesos (n=8). Durante 12 dias será realizada a análise do volume tumora, seguida de eutanásia. Posteriormente serão coletados o tecido tumoral, o plasma e os linfonodos mesentéricos e avaliados: concentração de insulina, leptina e adiponectina no plasma por ELISA; concentração de citocinas no tumor por citometria de fluxo; produção de lactato e captação de glicose em linfócitos mantidos em cultura na presença e ausência de estímulo; avaliação de atividade enzimas relacionadas ao metabolismo glicolítico e oxidativo em linfócitos por espectrofotometria; avaliação de expressão de genes envolvidos com metabolismo por PCR em tempo real e análise da taxa de consumo basal de oxigênio (OCR) e taxa de acidificação extracelular (ECAR) através do Seahorse. Com o presente estudo poderemos mostrar que o metabolismo de linfócitos pode ser uma peça-chave na compreensão das alterações no funcionamento destas células e da forma como elas se comportam diante de estímulos inflamatórios associados ao diabetes mellitus tipo 2 para favorecer a progressão do tumor. (AU)