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Constituição do complexo ribonucleoprotéico telomerase em linhagens de Leishmania major e Leishmania infantum com diferentes background genéticos

Processo: 24/00995-7
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
Data de Término da vigência: 19 de fevereiro de 2025
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Maria Isabel Nogueira Cano
Beneficiário:Beatriz Cristina Dias de Oliveira
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/04375-2 - Estudos sobre a biogênese e composição do complexo ribonucleoprotéico da telomerase de Leishmania spp. e sua regulação, AP.TEM
Assunto(s):Biologia molecular   Proteômica   Biogênese   Ribonucleoproteínas   Telomerase   Leishmania major   Leishmania infantum
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:biogênese | interatores | leishmania | ribonucleoprotein complex telomerase | telomerase RNA | biologia molecular e proteomica

Resumo

As leishmanioses são doenças crônicas causadas por protozoários flagelados do gênero Leishmania, os quais são transmitidos ao homem pela picada de insetos fêmeas infectados. A leishmaniose é tratada principalmente pela administração de antimoniais pentavalentes, embora eles sejam altamente tóxicos e não completamente efetivos. Portanto, para controlar a doença é necessário que se encontrem novos fármacos que alvejem vias parasito-específicas. Recentemente, os telômeros e a telomerase dos parasitas tem sido considerados alvos emergentes em potencial para o desenvolvimento de fármacos. A atividade de telomerase foi demonstrada em Leishmania, assim como os componentes básicos TERT (telomerase reverse transcriptase) e TER (telomerase RNA) foram identificados e caracterizados. Entretanto, a composição exata do complexo holoenzimático ainda não é conhecida. Neste trabalho pretendemos identificar novos componentes do complexo telomerase de Leishmania e suas interações cruciais requeridas para sua montagem. Resultados preliminares do nosso grupo demonstram que o ortólogo de Hsp90 do parasita, Hsp83, forma um complexo com a telomerase e provavelmente auxilia manter a homeostase telomérica, sendo considerado um integrante do complexo telomerase RNP. Neste projeto pretendemos identificar novos componentes do complexo telomerase em linhagens de L. major e L. infantum com diferentes background genéticos (por ex. selvagem, nocaute e superexpressor) usando co-imunoprecipitação, cromatografia de afinidade e análise proteômica por espectrometria de massa. Preliminarmente, candidatos a interatores do complexo telomerase serão validados usando soro-imune específico para imunolocalização subcelular e co-imunoprecipitação com a TERT e o componente TER nas diferentes fases de desenvolvimento dos parasitos. A identificação dessas proteínas trará com certeza uma compreensão mais aprofundada sobre a biogênese da telomerase de Leishmania e auxiliará a montar a rede de interações entre o complexo RNP e os telômeros do parasito. (AU)

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