Obtenção de compostos antimicrobianos de origem fúngica e identificação do mecanismo de ação por meio de biossensores para bactérias Gram-negativas

• Processo: 24/04081-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Estela Ynes Valencia Morante
• Beneficiário: Aline Isabella de Souza Goncalves
• CNAE: Pesquisa e desenvolvimento experimental em ciências físicas e naturais
• Vinculado ao auxílio: 23/04848-6 - Plataforma para bioprospecção do mecanismo de ação de moléculas antimicrobianas: prova de conceito e validação, AP.PIPE
• Assunto(s): Antibióticos Bactérias Fungos Metabólitos Plantas Pseudomonas aeruginosa Microbiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antibióticos | bactérias | fungos | metabólitos | plantas | Pseudomonas aeruginosa | Microbiologia

Resumo

A proposta pretende realizar a prova de conceito e validação da "ADP-MoA: Antibiotic Discovery Platform by Mechanism of Action", através da bioprospecção de moléculas obtidas de plantas, fungos filamentosos e bactérias, que tenham atividade antimicrobiana frente à bactéria multirresistente Pseudomonas aeruginosa PA14 geneticamente modificada. Nelas, há a fusão de um promotor específico (pSensor) ligado ao gene repórter lux (luciferase). Os sistemas (pSensor::lux) "acendem" em resposta à moléculas que causam dano ao DNA, inibição do ribossomo ou danos à membrana/parede celular, permitindo, assim, a observação da atividade antimicrobiana e identificação do mecanismo de ação da molécula, de forma simultânea. Serão selecionados fungos ambientais obtidos de uma biblioteca do Laboratório de Bioquímica e Biotecnologia de Proteínas da EACH/USP (www.sites.usp.br/lbbp), que foram coletados durante o projeto FAPESP/CONDEPHAT 2012/50038-1. Será selecionado fungos produtores de biomoléculas antimicrobianas pela técnica de confronto entre bactéria e fungo, posteriormente a obtenção de compostos antibacteriano de origem fúngico serão avaliados através da "plataforma de descoberta de antibióticos por mecanismo de ação" (ADP-MoA: Antibiotic Discovery Platform by Mechanism of Action) em meio sólido, determinando inibição de crescimento e mecanismo de ação. Ademais será determinado a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) com apoio da pesquisadora responsável para selecionar os melhores extratos e posteriormente serão cedidos para ensaios de miniaturização da plataforma em grande escala. O bolsista desenvolverá suas atividades no Laboratório de Bioquímica e Biotecnologia de Proteínas da EACH/USP (obtenção dos extratos fúngicos) e no Laboratório de Genética Bacteriana do ICB/USP (análise dos extratos, utilizando a plataforma ADP-MoA.