Métodos de maturação de oócitos e cultivo in vitro de embriões suínos

• Processo: 24/03119-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Animal
• Pesquisador responsável: Silvano Mario Attilio Raia
• Beneficiário: Georgina Pinheiro Hastenreiter
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/11872-5 - Centro de Ciência para o Desenvolvimento em Xenotransplante, AP.CCD
• Assunto(s): Microscopia eletrônica Oócitos Suínos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Microscopia Eletrônica | oócitos | Suínos | xenotransplante | Xenotransplante

Resumo

A produção de porcos geneticamente modificados a serem utilizados no xenotransplante dependede um amplo domínio de tecnologias de reprodução (WELLS & PRATHER, 2017). Em suínos, esseconjunto de tecnologias ainda é subdesenvolvido em comparação com outras espécies (LUCAS et al.,2019). Para a obtenção dos embriões geneticamente modificados, nosso laboratório tem utilizado aTransferência Nuclear de Células Somáticas (TNCS), também conhecida como clonagem, que consistena injeção de uma célula (cujo DNA genômico foi previamente modificado) no interior de um oócitoenucleado (WANG et al., 2020). A TNCS depende de diversas etapas: (1) Maturação in vitro (MIV) dosoócitos, (2) Transferência nuclear através de micromanipulação, (3) Fusão das membranas e ativação e(4) Cultivo in vitro (CIV) dos embriões. Entretanto, nenhuma dessas etapas apresenta um protocolo bemestabelecido (LUCAS et al., 2019), e os embriões provenientes do cultivo in vitro ainda têm um menorpotencial de desenvolvimento do que embriões derivados in vivo. Nesse contexto, é absolutamentenecessária a definição de protocolos robustos para transpor estas barreiras, envolvendo a seleção decondições externas adequadas e meios de cultivo otimizados para maturação, ativação e cultura deembriões, visando aumentar a taxa de eficiência na geração de animais geneticamente modificados.Devido ao fato de a produção de embriões in vitro depender de um protocolo extenso e envolver um amplodomínio de tecnologias de reprodução, somado à necessidade de se produzir embriões geneticamentemodificados em grande quantidade (mínimo de 100 embriões para cada porca receptora). Faz-senecessário aumentar a nossa capacidade de produção de embriões por meio de treinamento deprofissionais.Durante todo o desenvolvimento do projeto, a bolsista estará incumbida da manutenção doarcabouço regulatório necessário para certificação do laboratório e dar suporte na gestão da qualidade.