Obtenção e caracterização de epítopos e anticorpos recombinantes exclusivos de dengue: prospecção de ferramentas imunobiológicas

• Processo: 24/01846-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2024
• Situação: Interrompido
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Saúde Pública
• Pesquisador responsável: Daniela Luz Hessel da Cunha
• Beneficiário: Joyce Araújo de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/19577-3 - Estratégia baseada em epítopos para o diagnóstico diferencial e específico da dengue, BE.EP.MS
• Assunto(s): Anticorpos de cadeia única Imunobiológicos Proteínas recombinantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpos recombinantes | Denv | Imunobiológicos | Ns-1 | Proteinas recombinantes | Imunobiológicos

Resumo

A dengue é uma doença viral negligenciada e a cada ano infecta e provoca a morte de milhares de pessoas. Em áreas de co-circulação de arboviroses, o sorodiagnóstico diferencial da doença ainda é desafiador, por existir a possibilidade da reação cruzada das respostas de anticorpos entre flavivírus. O cenário piora pela falta de vacinas seguras e eficazes amplamente distribuídas na população geral. Neste contexto, é fundamental o desenvolvimento de novas ferramentas imunobiológicas tendo como alvo esse patógeno e todas as suas variantes. Anticorpos são moléculas muito utilizadas como ferramentas para diagnóstico e terapia para diversas doenças, devido a sua alta especificidade e afinidade. Utilizando a tecnologia do DNA recombinante e métodos como Phage Display, é possível ainda a obtenção desde VhH (nanobodies), obtido a partir de imunização de camelídeos, cujas imunoglobulinas são diferenciadas e geram biomoléculas únicas de reconhecimento ao antígeno até fragmentos de anticorpos recombinantes (rAbs), como os de cadeia scFv, Fab, com repertórios imunológicos in vitro, sem a necessidade de imunização direta de hospedeiros vivos. Em trabalho anterior, foram identificados e caracterizados in sílico dois epítopos imunogênicos da proteína NS1 do vírus da dengue (DENV), de uma região conservada nos quatro sorotipos circulantes do vírus e sem homologia com outros flavivírus. Neste contexto, esse projeto visa otimizar a produção recombinante desses peptídeos para serem utilizados como antígenos no desenvolvimento de diferentes formatos de anticorpos recombinantes (VhH, Fab e scFv) diferenciais para DENV, via Phage Display. Esses anticorpos serão purificados e caracterizados quanto sua especificidade e sensibilidade tanto ao peptídeo alvo, quanto a proteína NS-1 nativa. Uma vez obtidas essas ferramentas, espera-se explorar novas possibilidades de desenvolvimento de testes de detecção mais precisos e estratégias terapêuticas eficientes que possam contribuir para a vigilância, tratamento correto e prevenção da dengue. Este projeto tem o apoio do Centro para Vigilância Viral e Avaliação Sorológica (CeVIVAS), um dos Centros de Ciência para o Desenvolvimento (CCDs-SP) apoiado pela FAPESP, com sede no Instituto Butantan.