Efeito da retirada de plasma seminal e da temperatura do ambiente na curva de refrigeração e manutenção de qualidade de espermatozoides equinos refrigerados

• Processo: 24/13145-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Gabriel Augusto Monteiro
• Beneficiário: Vinicius Guilherme de Araújo
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Ambiental Calor Fertilidade Garanhões Viabilidade Andrologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ambiental | calor | fertilidade | Garanhões | Subfertilidade | Viabilidade | Andrologia

Resumo

A refrigeração de sêmen é uma biotecnologia amplamente utilizada na indústria equina. A técnica possibilita maximizar o uso de garanhões, evitar propagação de doenças, eliminar barreiras geográficas e, principalmente, aumentar a longevidade do sêmen. A preservação do sêmen refrigerado ocorre pela queda controlada de temperatura (curva de refrigeração) e consequentemente redução do metabolismo espermático, entretanto, variação na temperatura ambiental e presença de plasma seminal pode influenciar significativamente na curva e impactar na qualidade seminal. Nesse sentido, o objetivo do experimento é avaliar o efeito da retirada de plasma seminal a 5ºC, 22ºC e 37ºC, 2 diluentes na curva de refrigeração e qualidade seminal. Para isso serão utilizados, 2 ejaculados de 4 garanhões hígidos, de 5 a 22 anos, em rotina de coleta que previamente ao estudo serão submetidos a exame andrológico completo. Os ejaculados serão colhidos com vagina artificial, filtrado com filtro de náilon e fracionado em 4 alíquotas. Duas será mantido o plasma seminal e outras duas será retirado o plasma seminal pelo processo de centrifugação (600xg por 10 minutos) para posterior diluição até alcançar a concentração de 50 x 106 de espermatozoides/mL nos diluentes: BotuSêmen®, BotuSêmen Special®. Com isso serão 4 grupos experimentais: 1) BotuSemen com plasma seminal, 2) BotuSemen sem plasma seminal, 3) BotuSemenSpecial® com plasma seminal e 4) BotuSemenSpecial® sem plasma seminal (BSS/SP-). Após o processamento inicial as amostras serão acondicionadas nas caixas de refrigeração com 6 diferentes curvas: 1) Curva à 5ºC com 1 gelo; 2) Curva à 22ºC com 1 gelo; 3) Curva à 37ºC com 1 gelo, 4) Curva à 5ºC com 2 gelo; 5) Curva à 22ºC com 2 gelo e 6) Curva à 37ºC com 1 gelo. As amostras seminais serão avaliadas nos momentos: fresco (T0) e refrigeradas por 8 horas (T8) e 24 horas (T24) quanto a cinética espermática e integridade de membrana plasmática. A cinética espermática será realizada utilizando o aparelho de análise computadorizada (Hamilton Thorne Research - IVOS 12, Beverly, MA, USA), para mensuração da motilidade espermática total, motilidade espermática progressiva, velocidade de trajeto, velocidade linear, velocidade curvilínea e porcentagem de espermatozoides com movimento rápido. Além disso, uma alíquota será destinada à análise de integridade da membrana plasmática por microscopia de epi fluorescência. Os dados serão analisados utilizando ANOVA de medidas repetidas para comparar os efeitos dos tratamentos (retirada de plasma seminal, temperaturas e diluentes) na cinética espermática e integridade da membrana plasmática ao longo do tempo. A correção de Greenhouse-Geisser será aplicada quando necessário para ajustar a esfericidade dos dados. A significância estatística será estabelecida em um nível de 5% (p <0.05).