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Regulação redox de proteína serina treonina fosfatase mitocondrial dependente de metal PPTc7

Processo: 24/20191-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Luciana Elena de Souza Fraga Machado
Beneficiário:Mel Mirra de Carvalho Rachid
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Saccharomyces cerevisiae   Proteínas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Pptc7 | proteína fosfatase mitocondrial | regulação redox | Saccharomyces cerevisiae | Proteínas

Resumo

As proteínas fosfatases localizam-se no citosol e nas mitocôndrias e regulam diversas funções celulares através da desfosforilação de seus substratos, participando de mecanismos fundamentais de sinalização celular, como na resposta ao estresse, no metabolismo energético e na regulação da progressão celular. Entretanto, o conhecimento a respeito dos mecanismos de regulação das proteínas fosfatases mitocondriais ainda é muito restrito. Dados recentes de minha iniciação científica com bolsa BCO-FAPESP demonstram que a atividade da PPTc7 é inibida in vitro por oxidante e reativada pelo agente redutor DTT. Adicionalmente, observamos que a levedura ¿ptc7 apresenta sensibilidade à ação do peróxido de hidrogênio, mostrando-se mais resistente que a WT em meio de glicose e mais sensível em galactose (relatório em anexo). Dessa forma, o presente trabalho tem por objetivo analisar a regulação redox in vivo da proteína serina/ treonina fosfatase mitocondrial PPTc7 - proteína fundamental na ativação da enzima citrato sintase e na regulação do metabolismo mitocondrial através da modulação da biossíntese da CoQ10. Para isso, complementaremos a levedura ¿ptc7 com sua respectiva homóloga humana a fim de verificar o retorno de suas funções, além de quantificar os oxidantes gerados na levedura pela deleção do gene desta fosfatase e analisar aspectos funcionais desta proteína através de ensaios de respiração celular. Diante dos resultados obtidos anteriormente, esperamos que levedura ¿ptc7 retorne ao seu crescimento similar a WT quando complementada com a PPTc7 homóloga humana e que a respiração seja reduzida em meio galactose na levedura ¿ptc7. A partir destes resultados experimentais, ampliar-se-á o conhecimento a respeito dos mecanismos regulatórios da proteína fosfatase mitocondrial PPTc7 e, assim, contribuirá para análises futuras desta proteína.

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