"Efeito combinado de anti-VEGF e heparina quimicamente modificadas. Papel na inibic¿a¿o da angiogenese em doencas oculares, um estudo in vitro."

• Processo: 24/21930-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Helena Bonciani Nader
• Beneficiário: Ana Carolyne Izu Akamine
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/07464-4 - Glicosaminoglicanos na interação célula matriz extracelular: uma abordagem translacional, AP.TEM
• Assunto(s): Angiogênese Células endoteliais Matriz extracelular Glicobiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: angiogenese | células endoteliais | Heparina Anti-VEGF | matriz extracelular | Glicobiologia

Resumo

O presente projeto visa investigar a ação antiangiogênica de heparinas quimicamente modificadas, com foco na heparina-6-dessulfatada, em combinação com o bevacizumabe, um anticorpo monoclonal anti-VEGF. O estudo será conduzido em células endoteliais humanas, especificamente a linhagem ECV304, amplamente utilizada em pesquisas de angiogênese devido às suas características representativas de células endoteliais. Introdução: A angiogênese é um processo fundamental que consiste na formação de novos vasos sanguíneos a partir de uma vasculatura preexistente. Este processo é crucial tanto em condições fisiológicas, como a cicatrização de feridas e a reprodução, quanto em condições patológicas, incluindo o crescimento tumoral, metástases e doenças degenerativas como a degeneração macular relacionada à idade e a retinopatia diabética. A angiogênese envolve uma série de etapas complexas reguladas por fatores de crescimento, citocinas, moléculas sinalizadoras e componentes da matriz extracelular (MEC). A MEC desempenha um papel essencial na angiogênese, atuando como um suporte estrutural e funcional para células e tecidos. Dentre os componentes da MEC, destacam-se as glicoproteínas laminina e fibronectina, além dos glicosaminoglicanos (GAGs) e proteoglicanos. Os GAGs, como o heparam sulfato e a heparina, são polissacarídeos lineares que interagem com diversas moléculas, incluindo fatores de crescimento, modulando processos biológicos como proliferação, migração e diferenciação celular. A heparina é um GAG sulfatado conhecido por sua atividade anticoagulante. Sua estrutura é composta por dissacarídeos alternados de ácido L-idurônico e D-glucosamina, com uma alta densidade de grupos sulfato. Devido ao seu caráter polianiônico, a heparina interage com várias proteínas, influenciando uma série de processos biológicos, incluindo a modulação da angiogênese. Quando modificada quimicamente a heparina pode perder a atividade anticoagulante e hemorrágica sem perder a atividade anti-inflamatória e anti-angiogênica. Objetivos: O objetivo geral deste trabalho é avaliar a ação da heparina-6-dessulfatada em combinação com bevacizumabe como agentes anti-angiogênicos in vitro em células endoteliais humanas avaliando proliferação, viabilidade e formação de estruturas do tipo capilar em cultura e compreender o papel dos componentes da MEC neste contexto. Materiais e Métodos: Serão utilizadas células da linhagem ECV304, que são células endoteliais humanas derivadas de carcinoma de bexiga, amplamente utilizadas em estudos de angiogênese devido à sua capacidade de formar estruturas semelhantes a capilares. As células serão cultivadas em condições específicas para assegurar seu crescimento e viabilidade. A heparina-6-dessulfatada será preparada removendo seletivamente os grupos sulfato presentes no carbono 6 da glucosamina da heparina, resultando em uma forma quimicamente modificada sem atividade anticoagulante. O bevacizumabe, um anticorpo monoclonal anti-VEGF, será utilizado em combinação com a heparina modificada para avaliar seu efeito sinérgico na inibição da angiogênese. Os experimentos incluirão ensaios de proliferação celular, migração celular e formação de estruturas capilares em Matrigel, além de análises de imunofluorescência para avaliar a interação das células com os componentes da MEC. Este projeto busca contribuir para a compreensão dos mecanismos antiangiogênicos de heparinas quimicamente modificadas e suas interações com a MEC, abrindo novas perspectivas para o desenvolvimento de terapias contra doenças angiogênicas e neoplásicas.