Manipulação e genotipagem de animais transgênicos knockout para PAD4 em estudos de sepsis e artrite reumatóide

• Processo: 25/05531-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
• Pesquisador responsável: Fernando de Queiroz Cunha
• Beneficiário: Marielly Gonçalves Valentim
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08216-2 - CPDI - Centro de Pesquisa em Doenças Inflamatórias, AP.CEPID
• Assunto(s): Extração de DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cruzamentos de camundongos geneticamente modificados | Eletroforese em gel de agarose | Extracao de DNA | Genotipagem de camundongos | Preparo de soluções | reação de PCR | imunogenética

Resumo

O objetivo do projeto é capacitar recurso humano para a produção de camundongos deficientes da enzima PAD4, os quais são fundamentaispara nossos estudos em SEPSIS E ARTRITE REUMATOIDE, bem como para técnicas de cultura celular, extração de DNA, reação de PCR eeletroforese em gel de agarose. A tarefa principal será preparação de material e meios para cultura de células, genotipagem de camundongos e amanutenção da colônia de animais knockout para PAD4, bem como seu cruzamento com outras linhagens, com objetivo de obter animais quesejam KO apenas em neutrófilos.Inicialmente o bolsista receberá treinamento e capacitação sobre as normas de biossegurança do laboratório e sobre o uso e manipulação deanimais de experimentação segundo as normas do comitê de ética dessa Universidade. O bolsista será responsável pela esterilização de materiais epreparo de soluções para cultura celular, pelo cruzamento de camundongos geneticamente modificados (formação de casais e troca das caixas),coleta de amostras, extração de DNA, reação de PCR e eletroforese em gel de agarose. É importante salientar que essas atividades são essenciaispara dar andamento em vários projetos desenvolvidos no nosso centro de pesquisa.O bolsista também realizará outras tarefas como processamento de tecidos coletados para a realização de diversas técnicas como histologiae citometria de fluxo, além de participar das discussões científicas do grupo. O estágio desenvolvido pelo bolsista, além de permitir o aprendizadode diferentes técnicas realizadas no laboratório, permitirá desenvolver o senso crítico científico e estímulo para a prática da pesquisa.