PRODUÇÃO DE NOVOS CANDIDATOS VACINAIS EXPRESSOS POR FORMAS INVASIVAS DE Staphylococcus aureus MDR

• Processo: 25/05574-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Thiago Rojas Converso
• Beneficiário: Gabriela Claudia Mantini Cangussú
• Instituição Sede: Universidade São Francisco (USF). Campus Bragança Paulista. Bragança Paulista , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas recombinantes Staphylococcus aureus Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: candidatos vacinais | Proteinas recombinantes | Staphylococcus aureus | Biologia Molecular

Resumo

Staphylococcus aureus é um agente bacteriano pertencente à microbiota humana, com alta patogenicidade ao ser humano, sendo classificado como um agente oportunista; em circunstâncias específicas, como quebra da barreira epitelial, aumento da temperatura corporal, imunidade deficiente, pode alterar o seu fenótipo de biofilme (colonizante) para um fenótipo invasor, causando infecções ao organismo. Ademais, possui multirresistência a antimicrobianos, tornando os métodos terapêuticos com antibióticos em parte eficazes, devido a durabilidade da eficiência de tais terapias. Logo, para combate a este agente, tem-se estudado a utilização de terapias preventivas. Portanto, utilizando da tecnologia de DNA recombinante, o projeto propõe a produção de novos candidatos vacinais expressos pelas formas invasivas de Staphylococcus aureus MDR para imunização, por meio da produção de proteínas recombinantes. Isto se dará mediante a técnica de PCR convencional para amplificação de genes codificantes de interesse da cepa de S. aureus NRS384. Após clonagem, os genes serão ligados em vetor pGEM-T easy para clonagem em sistema E.coli e seguidamente, em vetor Pet28a, específico para expressão de proteínas. Para indução da expressão de proteínas, será utilizado IPTG e para purificação, cromatografia de afinidade ao Níquel. As proteínas serão confirmadas por sequenciamento e pelo método de Western Blot, utilizando anticorpo específico contra cauda de histidina. Ao final, as proteínas expressas serão: ISDC_STAA8; Q2G1E9_STAA8; Q2FV70_STAA8; Q2G2E0_STAA8. O projeto, até o momento, garantiu a clonagem de dois genes de interesse.