Eficácia e resposta imune após administração de uma dose reforço contra Mycoplasma hyopneumoniae na fase de terminação utilizando uma vacina oral contendo a sílica nanoestruturada SBA-15 como adjuvante

• Processo: 24/22516-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Luís Guilherme de Oliveira
• Beneficiário: Gabriel Alexandre de Aguiar
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Citocinas Nanotecnologia Resposta imune
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: citocinas | dose reforço | Nanotecnologia | resposta imune | Sus scrofa domesticus | Enfermidades infecciosas

Resumo

Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da Pneumonia Enzoótica Suína (PES), uma doença crônica do trato respiratório desses animias que leva a uma perda contínua de desempenho desses animais, apresentando uma alta morbidade e baixa mortalidade, levando a grandes impactos econômicos para as granjas produtoras. As vacinas disponíveis comercialmente, por mais que ajudem no controle dos sinais clínicos e lesões no trato respiratório, não impedem a infecção e colonização do epitélio desses animais. Logo, o objetivo do trabalho será avaliar a eficácia de diferentes protocolos vacinais contra Mycoplasma hyopneumoniae com a administração de uma dose reforço da vacina oral contendo a sílica nanoestruturada SBA-15 como adjuvante na fase de terminação. Para a execução deste projeto, 40 leitões com 21 dias de idade serão adquiridos de uma granja livre de M. hyopneumoniae, que serão dividos em quatro grupos experimentais, sendo eles: G1 (controle negativo): leitões que não receberão nenhum tipo de imunização; G2: leitões vacinados aos 25 dias de idade com uma vacina comercial de dose única contra M. hyopneumoniae; G3: leitões vacinados aos 25 dias de idade (D0) com a vacina comercial de dose única contra M. hyopneumoniae, recebendo uma dose de reforço da vacina oral, contendo a sílica SBA-15, aos 65 dias (D40); G4: leitões vacinados aos 25 dias de idade (D0) com uma dose da vacina oral, contendo a sílica SBA-15, contra M. hyopneumoniae, recebendo uma dose de reforço a mesma vacina oral aos 65 dias (D40). Quinze dias após a administração das doses de reforço das vacinas (D55), dois animais de cada grupo serão eutanasiados e os outros oito serão desafiados com 10^6 CCU/ml de M. hyopneumoniae pela via endotraqueal, o restante dos animais serão eutanasiados 45 dias após as últimas imunizações (D85). Imediatamente antes da imunização (D0), os animais serão pesados e passarão pelo exame físico, assim como serão submetidos a colheita de sangue e de suabes nasais e laríngeos. Após a primeira coleta, os animais serão pesados nos momentos D15, D40, D55, DD65, D75 e D85 para o cálculo do ganho de peso diário. Para a avaliação da expressão de citocinas (IFN- ¿ IL-6 e IL-10) será utilizado o soro sanguíneo das amostras colhidas nos momentos D0, D3, D40, D43, D55 e D58 por meio de ELISA. Já a detecção de IgA e IgG será realizada por meio de amostras de suabes nasais e soro sanguíno dos momentos D0, D15, D40, D55, D65, D75, D85. Após o desafio dos animais (D55), será feita a colheita de suabe laríngeo para a avaliação da excreção de M. hyopneumoniae em D58, D65, D75 e D85. A avaliação de lesões macroscópicas nos pulmões e a colheita de fragmentos de pulmão e de baço será realizada durante a necropsia dos animais. As amostras de baço coletadas serão utilizadas para avaliação da expressão das citocinas (IFN- ¿ IL-6, IL-10, IL-17 e TNF- ¿). A técnica de histopatilogia será utilizada para a detecção de lesões pulmonares oriundas da infecção pelo patógeno após o desafio dos animais. Os dados obtidos serão submetidos primeiramente ao teste de Shapiro-Wilk para o teste da normalidade. Caso os dados apresentem uma distribuição normal, serão submetidos a análise de variância (ANOVA) com teste de Tukey (p<0,05) para comparação entre os grupos. E caso a normalidade não tenha sido atestada ou forem dados não paramétricos, será utilizado o teste de Kruskal-Wallis com teste de Dunn (p<0,05). O teste de Pearson ou Spearman será utilizado para a avaliação de correlações entre as variáveis estudadas.