Desenvolvimento e Aplicação da Edição primária por CRISPR (CRISPR-PE) para Engenharia Genômica Precisa em BCG.

• Processo: 25/21266-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2026
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Alex Issamu Kanno
• Beneficiário: Paulo Henrique Santana Silveira
• Supervisor: Coenraad Kuijl
• Instituição Sede: Instituto Butantan. São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Amsterdam University Medical Center, Países Baixos
• Vinculado à bolsa: 22/10136-6 - Estudos da aplicação do CRISPR em BCG com foco na geração de vacinas aprimoradas, BP.DD
• Assunto(s): Vacina BCG Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bcg | Crispr | prime editing | Biotecnologia

Resumo

A tuberculose (TB) continua sendo um grande desafio para a saúde global, causando mais de 1,25 milhão de mortes por ano. O avanço das ferramentas de diagnóstico e o desenvolvimento de intervenções mais eficazes são prioridades críticas. A vacina Bacillus Calmette-Guérin (BCG), atualmente a única disponível contra a TB, apresenta eficácia variável contra a forma pulmonar da doença em adultos, em parte devido à manutenção de mecanismos de evasão imunológica herdados de seu organismo parental, Mycobacterium bovis. Um desses mecanismos é a inibição da autofagia em células imunes, processo essencial para o desenvolvimento de respostas imunológicas robustas contra a TB.As manipulações genéticas têm se mostrado alternativas promissoras para o desenvolvimento de novas vacinas baseadas na BCG, permitindo o aumento de suas propriedades imunogênicas. Nesse contexto, nosso laboratório realizou com sucesso o knockout genético da BCG utilizando a tecnologia CRISPR/Cas; entretanto, o processo apresentou baixa eficiência. Essa limitação provavelmente se deve à ativação de mecanismos ineficazes de reparo do DNA após as quebras de fita dupla (DSBs) induzidas pelo sistema CRISPR/Cas.Para superar esse desafio, este projeto propõe o uso do Prime Editing (PE), uma tecnologia de edição genômica inovadora e precisa que não depende da indução de DSBs. Ao evitar essas quebras, o PE minimiza os danos ao DNA, aumentando a eficiência da edição e preservando a viabilidade celular. Este estudo tem como objetivo explorar o potencial combinado do CRISPR/Cas e do PE para aprimorar a manipulação genética da BCG, contribuindo para o desenvolvimento de vacinas mais eficazes contra a tuberculose.