Caracterização do promotor basal de BhC4-1 no sistema GAL4-UAS em Drosophila transgênicas

• Processo: 06/02111-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nadia Monesi
• Beneficiário: Adriana Cardoso Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Drosophila Transgenicas | Ensaios Funcionais | Expressao Genica Em Eucariotos | Promotor Basal | Pufes De Dna | Uas-Gal4 | análise de promotores de eucariotos

Resumo

Nosso laboratório estuda os mecanismos controladores da transcrição de genes de pufes de DNA e utiliza como modelo o gene BhC4-1, amplificado e abundantemente transcrito no pufe de DNA C4 de Bradysia hygida, no final do último estádio larval. Estudos funcionais em Drosophila transgênicas identificaram regiões no promotor de BhC4-1 que contêm elementos cis-reguladores da expressão de BhC4-1. Uma destas regiões constitui o promotor basal de BhC4-1, localizado no fragmento de 97pb (-57/+40, posições definidas em relação ao sítio de início da transcrição, +1). Resultados anteriores revelaram que o fragmento de 97 Pb (-57/+40) se deixa regular pelo "enhancer" de corpo gorduroso do gene Fbp1 de Drosophila. O presente projeto pretende verificar se o promotor basal de BhC4-1 funciona em outros tempos do desenvolvimento e em diferentes tecidos empregando o sistema UAS-GAL4. A abordagem consiste em obter linhagens transformadas com uma construção na qual o fragmento de 97pb (-57/+40) estará posicionado à jusante do UAS. As linhagens transgênicas UAS/97pbBhC4-1 obtidas serão cruzadas com diferentes linhagens, provenientes de bancos de estoques, que expressam GAL4 em diferentes tempos do desenvolvimento e em diferentes tecidos. Os resultados obtidos trarão novas informações a respeito de quão permissivo é o promotor basal de BhC4-1 e contribuirão na caracterização de promotores basais de eucariotos. (AU)